Введение
1. Список используемых сокращений 4
2. Введение
3.1. Актуальность проблемы 5
3.2. Цели и задачи исследования 6
3.3. Основные положения, выносимые на защиту
3.4. Научная новизна полученных результатов 7
3.5. Теоретическое и практическое значение работы 7
3.6. Личный вклад автора 8
3.7. Апробация работы 8
3.8. Финансовая поддержка работы. 8
3.9. Публикации 8
3. Обзор литературы 11
3.1. Общая характеристика нейродегенеративных заболеваний 11
3.2. Полиглутаминовые заболевания.
3.2.1. Общие сведения 15
3.2.2. Модели полиглутаминовых заболеваний . 19
3.2.3. Агрегация полиглутаминовых белков. 21
3.3. Межклеточный перенос белков 22
3.3.1. Прионные белки 22
3.3.2. Неприонные белки 24
3.4. Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа 36
4. Материалы и методы исследований 42
4.1. Белки и пептиды 42
4.2. Клеточные культуры и условия культивирования 42
4.3. Ультрафильтрация: метод ловушки на фильтре 44
4.4. ГАФД иммуноферментный анализ 45
4.5. Проточная цитометрия 46
4.6. Клеточный иммуноферментный анализ 46
4.7. Определение активности дегидрогеназ по Мосману 47
4.8. Определение активности лактатдегидрогеназы 47
4.9. ПААГ-ДСН электрофорез и иммуноблоттинг 48
4.10. Статистическая обработка результатов
5. Результаты 49
5.1. ГАФД и polyQ высвобождаются из клеток, индуцированных к экспрессии HTTQ103 49
5.2. ГАФД способствует прион-подобному поведению Q58 в нормальных клетках 57
5.3. ГАФД транспортирует polyQ внутрь живых клеток с помощью клатрин-зависимого эндоцитоза 62
5.4. В клеточной модели БХ внеклеточные агрегаты polyQ-ГАФД обладают большей цитотоксичностью, чем внутриклеточные агрегаты 65
6. Обсуждение 69
7. Заключенпие 77
8. Выводы 79
9. Списокцитируемойлитературы 80
