Введение
ГЛАВА 1 Современные энтеросорбенты и их место в лечении и профилактике острых кишечных заболеваний 14
1.1 Энтеросорбенты в медицинской практике 14
1.2 Механизмы действия энтеросорбентов 21
ГЛАВА 2 Биотехнологические основы конструирования селективных энтеросорбционных препаратов
2.1 Методы получения селективных энтеросорбентов 25
2.2 Матрицы-носители в сорбционных системах 31
Собственные исследования 36
Глава 3 Объекты, материалы и методы 36
3.1 Объекты исследования 36
3.1.1 Бактериальный штамм 36
3.1.2 Бактериальный антиген 36
3.1.3 Лабораторные животные 37
3.1.4 Сыворотки и иммуноглобулины 37
3.1.5 Сорбционные матрицы 38
3.2 Материалы и методы исследований... 38
3.2.1 Реактивы и растворы 38
3.2.2 Питательные среды 40
3.2.3 Приборы и оборудование 40
3.2.4 Проведение осадительной коацервации 43
3.2.5 Определение концентрации белка 43
3.2.6 Определение емкости сорбционной матрицы и степени извлечения белка 43
3.2.7 Реакция диффузной преципитации по Оухтерлони 44
3.2.8 Определение токсиннейтрализующей активности 44
3.2.8.1 Постановка кожной пробы по Крейгу 44
3.2.8.2 Постановка теста отека задней конечности 45
3.2.8.3 Определение токсиннейтрализующей активности в тонком кишечнике кроликов-сосунков 46
3.2.9 Дот-иммуноанализ 46
3.2.10 Определение адсорбционной способности по метиленовому синему 46
3.2.11 Определение белок-связывающей способности 47
3.2.12 Определение сыпучести лиофилизированного специфического энтеросорбента 48
3.2.13 Определение насыпного объема и угла откоса порошка и гранулята специфического энтеросорбента 48
3.2.14 Определение потери в массе при высушивании 48
3.2.15 Определение прочности таблеток 48
3.2.16 Испытания на истираемость таблеток 49
3.2.17 Определение распадаемости таблеток специфического энтеросорбента 49
3.2.18 Статистическая обработка результатов исследований 49
Результаты и обсуждение 50
ГЛАВА 4 Разработка биотехнологической схемы получения противохолерного антитоксического энтеросорбента 50
4.1 Получение высокоактивных антитоксических сывороток и
иммуноглобулинов 50
4.1.1 Обоснование выбора адъюванта для получения высокоактивных антитоксических сывороток 53
4.1.2 Выделение иммуноглобулиновой фракции 56
4.2 Обоснование выбора и подготовка сорбционных матриц 59
4.3 Изучение эффективности иммобилизации антитоксических иммуноглобулинов на сорбционных матрицах 61
4.4 Изучение процесса десорбции иммуноглобулинов с сорбционных
4.5 Конструирование антитоксического противохолерного энтеросорбента 67
ГЛАВА 5 Изучение функциональной активности сконструированного антитоксического энтеросорбента 72
5.1 Изучение токсиннейтрализующей активности специфического энтеросорбента в тестах на лабораторных животных 72
5.1.1 Исследование токсиннейтрализующей активности специфического энтеросорбента в кожной пробе по Крейгу 72
5.1.2 Изучение токсиннейтрализующей активности в тесте отека задней конечности 74
5.1.3 Изучение токсиннейтрализующей активности в тонком кишечнике кроликов-сосунков 77
5.2 Определение общей адсорбционной способности специфического энтеросорбента по фармакологическим маркерам 80
5.3 Определение специфической активности антитоксического энтеросорбента in vitro в дот-иммуноанализе 83
5.4 Выявление корреляции результатов дот-иммуноанализа in vitro и теста по Крейгу in vivo 86 CLASS ГЛАВА 6 Разработка экспериментальной лекарственной формы выпуска специфического энтеросорбента CLASS
6.1 Лиофилизация специфического энтеросорбента и изучение технологических характеристик порошка-лиофилизата 89
6.2 Гранулирование специфического энтеросорбента 92
6.3 Таблетирование специфического энтеросорбента 93
6.4 Изучение лечебно-профилактической эффективности специфического энтеросорбента при внутрикишечном заражении биомоделей вирулентным штаммом Vibrio cholerae О1 96
ГЛАВА 7 Исследование стабильности экспериментального специфического энтеросорбента 9
7.1 Изучение стабильности антитоксического энтеросорбента в условиях, моделирующих желудочно-кишечный тракт 99
7.2 Изучение стабильности антитоксического энтеросорбента в процессе хранения
Заключение
Выводы
Список сокращений список литературы
