Введение
1 Литературный обзор 14
1.1 Способы биотестирования пищевых продуктов, ингредиентов и кормов 14
1.2 Микрофлора мясных продуктов и способы ее изучения
1.2.1 Бактериальные стартовые культуры в мясной промышленности. 19
1.2.2 Применение молекулярно-генетических методов для оценки микробной безопасности мясных продуктов 22
1.2.3 Применение T-RFLP-анализа для изучения микрофлоры пищевых продуктов 24
1.3 Применение микроорганизма Lactobacillus plantarum для профилактики
и лечения заболеваний ЖКТ сельскохозяйственных животных и птицы .28
1.3.1 Использование Lactobacillus plantarum в рационе сельскохозяйственных птиц 29
1.3.2 Использование Lactobacillus plantarum в свиноводстве .32
Заключение по обзору литературы 35
2 Объекты и методы исследований 37
2.1 Схема проведения исследований 37
2.2 Объекты исследований 38
2.3 Методы исследований 38
2.3.1 Методы культивирования и исследования клеток животных и человека 38
2.3.2 Микробиологические методы .42
2.3.3 Молекулярно-генетические методы .51
2.3.4 Методы оценки безопасности микроорганизмов на мышах 58
2.3.5 Исследования образцов мясных продуктов 62
2.3.6 Исследования на бройлерах 64
2.3.7 Статистическая обработка экспериментальных данных 66
Результаты исследований 67
3 Разработка способа биотестирования на клеточных тест-системах 67
3.1 Выбор клеточных тест-систем 67
3.2 Анализ ростовой кинетики клеточных тест-систем .68
3.3 Метод определения безопасности пищевых ингредиентов 71
3.4 Метод определения безопасности пробиотических микроорганизмов .73
Заключение к главе 3 76
4 Выделение и комплексные исследования стартовых культур – новых пищевых ингредиентов микробного происхождения .77
4.1 Анализ микрофлоры ферментированного мясного продукта .77
4.1.1 Определение общего количества микроорганизмов и лактобактерий методом ПЦР-РВ .77
4.1.2 Исследование микрофлоры продукта методом T-RFLP .78
4.2 Выделение, идентификация и комплексное исследование новых штаммов микроорганизмов 81
4.2.1 Идентификация выделенных микроорганизмов 81
4.2.2 Морфологические и культуральные свойства 83
4.2.3 Физиолого-биохимические свойства выделенных штаммов .84
4.2.4 Технологические свойства выделенных микроорганизмов. 86
4.2.5 Пробиотические свойства выделенных микроорганизмов .87
4.3 Биотестирование молочнокислых микроорганизмов на клеточных тест системах 88
4.4 Исследование безопасности молочнокислого микроорганизма Staphylococcus carnosus на мышах .97
Заключение к главе 4 98
5 Получение нового пробиотического штамма для животноводства на основе молочнокислого микроорганизма Lactobacillus plantarum L-211 .100
5.1 Исследование комплекса характеристик штамма L. plantarum L-211...100
5.1.1 Идентификация штамма по биохимическому профилю. 100
5.1.2 Морфологические и культуральные свойства .100
5.1.3 Физиолого-биохимические свойства штамма 101
5.1.4 Технологические свойства молочнокислого микроорганизма 104
5.1.5 Пробиотические свойства штамма 104
5.1.6 Молекулярно-генетическая идентификация штамма .
5.2 Биотестирование L. plantarum L-211 на клеточных тест-системах .113
5.3 Оценка безопасности Lactobacillus plantarum L-211 на мышах 114
Заключение к главе 5 115
6 Комплексная оценка технологических и потребительских характеристик ферментированного мясного продукта с бактериальной композицией стартовых культур 117
6.1 Выбор заквасочных микроорганизмов для ферментированного мясного продукта 117
6.2 Выработка сырокопченой колбасы со стартовыми культурами 119
6.3 Исследование характеристик конечного мясного продукта 121 Заключение к главе 6 122
7 Оценка пробиотической активности штамма Lactobacillus plantarum L-211 и влияние на микрофлору цыплят-бройлеров . 123
7.1 Результаты T-RFLP-анализа микрофлоры слепых отростков бройлеров 123
7.2 Влияние L. plantarum на нормофлору кишечников бройлеров. 124
7.3 Влияние Lactobacillus plantarum на «нежелательную» микрофлору .125
7.4 Влияние L. plantarum на количество патогенных микроорганизмов .126
7.5 Влияние L. plantarum на количество некультивируемых бактерий... 127
7.6 Влияние Lactobacillus plantarum L-211 на транзитную микрофлору .128
Заключение к главе 7 128
Выводы 129
Сокращения 131
Список использованных источников
