Введение
1. Литературный обзор 10
1.1. Аминокислоты и методы их анализа 10
1.1.1. Общие положения 10
1.1.2. Методы анализа- 12
1.1.3. Способы детектирования 17
1.2. Низкомолекулярные аминотиолы плазмы крови и методы их анализа - 25
1.2.1. Гомоцистеин и его метаболизм в организме человека 25
1.2.2. Методы анализа гомоцистеина 30
1.2.3. Способы идентификации гомоцистеина - 35
1.2.3.1. Методы, не требующие предварительной дериватизации 35
1.2.3.2. Методы с предварительной дериватизацией 37
1.3. Методы разделения и идентификации полинуклеотидов 45
1.3.1. Нуклеиновые кислоты. Общие положения- 45
1.3.2. Дезоксирибонуклеиновые кислоты. Методы анализа 46
1.3.3. Капиллярный гель-электрофорез. Основы метода.
1.3.4. Определение мутаций генов 55
2. Экспериментальная часть 61
2.1. Реактивы и материалы 61
2.2. Приготовление рабочих растворов 62
2.3. Приборы и оборудование - 65
2.4. Общая методология работы 66
2.4.1. Анализ свободных генетически кодируемых аминокислот методом капиллярного электрофореза 66
2.4.2. Анализ гомоцистеина, цистеина и глутатиона методами ОФ ВЭЖХ и капиллярного электрофореза 67
2.4.3. Анализ олигонуклеотидов методом капиллярного гель-электрофореза 72
3. Результаты и их обсуждение 74
3.1. Определение свободных кодируемых аминокислот 74
3.1.1. Определение методом капиллярного зонального электрофореза 74
3.1.2. Определение методом мицеллярной электрокинетической хроматографии 81
3.2. Определение гомоцистеина и других низкомолекулярных аминотилов плазмы крови 91
3.2.1. Определение микроколоночной ОФ ВЭЖХ 91
3.2.2. Определение методом капиллярного электрофореза 114
3.3. Определение мутаций в молекулах ДНК методом капиллярного гель-электрофореза 121
Выводы 130
Список литературы 131
