Введение
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1. Суть и значение биологического метода защиты растений 8
1.1.1. Механизмы действия полезных почвенных микроорганизмов 9
1.1.2. Достоинства и недостатки препаративных форм биопестицйдов 16
1.1.3. Экосистема обитания биологических агентов 18
1.2. Природная и искусственная иммобилизация клеток микроорганизмов...20
1.2.1. Иммобилизация микроорганизмов в почве и её преимущества 20
1.2.2. Поведение биообъектов, вносимых в почву 22
1.2.3. Способы иммобилизации клеток 24
1.2.4. Выход клеток из иммобилизованного состояния в свободное 28
1.2.5. Применение иммобилизованных клеток для защиты окружающей среды 30
1.2.6. Иммобилизация клеток совместно с субстратом 32
1.3. Заключение 33
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 35
2.1. Объекты исследования 35
2.2. Состав и приготовления питательных сред 36
2.3. Культивирование 37
2.3.1. Приготовление инокулята 37
2.3.2. Культивирование 37
2.4. Методы анализа 38
2.4.1. Определение концентрации белка в растворе методом Лоури 38
2.4.2. Определение концентрации крахмала в растворе модифицированным методом Бертрана 39
2.4.3. Метод анализа концентрации клеток в Са-альгинатных гранулах 40
2.5. Иммобилизация клеток микроорганизмов 40
2.7. Характеристики реактивов 41
2.8. Метод определения антагонистической активности 43
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 44
Часть 1. Исследование влияния иммобилизации на стабильность вегетативных клеток 44
1.1. Определение стабильности иммобилизованных клеток при хранении.. 45
1.2. Определение выхода клеток из иммобилизованного состояния 47
1.3. Разработка методов анализа выхода клеток из гранул при попадании в почвенную экосистему | 49
1.4. Сравнение кинетики роста клеток из гранул и кинетики роста клеток суспензии, внесённых в торфа 56
Часть 2: Разработка новой иммобилизованной системы «полисахаридная матрица-клетка-субстрат» 58
2.1. Обоснование выбора субстрата для совместной иммобилизации 58
2.2. Исследование диффузии иммобилизованных субстратов из Са-альгинатных гранул 59
2.2.1. Исследование диффузии крахмала 59
2.2.2. Исследование диффузии желатина 61
2.3. Исследование метаболизма иммобилизованного субстрата 62
2.3.1. Исследование метаболизма иммобилизованного крахмала клетками гриба Т. viride 62
2.3.2. Исследование метаболизма иммобилизованного желатина клетками P.fluorescens 63
2.4. Исследование роста клеток за счёт метаболизма иммобилизованного субстрата 64
2.4.1. Рост T.viride из гранул на предметном стекле во влажной камере 65
2.4.2. Рост P.fluorescens из гранул на предметном стекле во влажной камере 67
2.5. Исследование взаимодействия тест-объекта Fusarium oxysporum с иммобилизованной системой 70
2.5.1. Исследование взаимодействия тест-объекта Fusarium oxysporum с иммобилизованными совместно с крахмалом клетками T.viride 70
2.5.2. Исследование взаимодействия тест-объекта Fusarium oxysporum иммобилизованными совместно с желатином клетками P.fluorescens 71
2.6. Изучение срока хранения иммобилизованных систем 72
Часть 3: Изучение свойств иммобилизованной системы «полисахаридная матрица-клетки-субстрат» 77
3.1. Исследование влияния концентрации субстрата на рост иммобилизованных клеток из гранул рост колонии T.viride вокруг
3.1.1. Исследование влияния концентрации крахмала на рост солоний гриба T.viride вокруг гранулы 1 80
3.1.2. Исследование влияния концентрации желатина на P.fluorescens вокруг гранул
3.1.3. Исследование влияния смеси субстратов на рост колоний гранул.
3.2. Исследование влияния концентраций альгината натрия на рост иммобилизованных клеток из гранул 88
3.2.1. Исследование влияния концентрации альгината натрия ria рост клеток
3.2.2. Исследование влияния концентрации альгината натрия на рост клеток P.fluorescens 90
3.3. Исследование влияния физиологического состояния и концентрации клеток на образование колоний вокруг гранул.
3.3.1. Исследование влияния концентрации клеток T.viride на рос^ колоний...92
3.3.2. Исследование влияния возраста культуры T.viride из гранул
3.3.3. Исследование влияния концентрации клеток P.fluorescens на рост гранул системы матрица-колонии
3.4. Исследование влияния размера гранул на рост колоний вокруг
3.5. Предполагаемая модель роста колоний вокруг иммобилизованной «полисахаридная матрица-клетки-субстрат»
Часть 4: Изучение иммобилизованной системы «полисахаридная клетки-субстрат» в качестве новой препаративной формы
4.1. Исследование объёмной колонизации торфа семян .112
4.1.1. Исследование колонизации разных объёмов торфа
4.1.2. Исследование колонизации объёмов торфов в динамичном
4.2. Исследования влияния иммобилизованной системы на всхожесть
Часть 5: Наработка опытной партии и проведение производственных огурца. испытании
5.1. Наработка опытной партии
5.2. Проведение производственных испытаний
Часть 6: Изучение влияния пестицидов на иммобилизованную сибтему 118
6.1 .Исследование воздействия пестицидов на иммобилизованные системы с
клетками T.viride , 120
6.1.1. Исследование влияния фитоплазмина 120
6.1.2. Исследование влияния фитолавина-300 122
6.1.3. Исследование влияния квадриса 124
6.2. Исследование воздействия пестицидов на иммобилизованные системы с клетками P.fluorescens 125
6.2.1. Исследование влияния фитоплазмина 126
6.2.2. Исследование влияния фитолавина-300 126
6.2.3. Исследование влияния квадриса 127
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 130
ВЫВОДЫ 132
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 133
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 134
Приложение 1: Акты испытаний 144
Приложение 2: Технические условия 149
