Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1. Анализ методов исследования и особенностей природных ассоциаций углеводородокисляющих бактерий (ПАУОБ) 8
1.1.1. Выделение и исследование ПАУОБ 8
1.1.2. Качественный состав ПАУОБ 11
1.1.3. Физиологические и биохимические свойства углеводородокисляющих бактерий (УОБ) 13
1.1.3.1. Поверхностно-активные свойства УОБ 16
1.1.3.2. Бактериальный матрикс 20
1.1.3.3. Биохимические пути окисления углеводородов бактериями 22
1.2. Способы очистки нефтезагрязнённых акваторий 27
1.2.1. Биовосстановление нефтезагрязнённых акваторий 35
1.2.2. Биопрепараты 36
1.3. Методы определения эффективности бактериальной очистки нефтезагрязнённых акваторий 42
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 48
2.1. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 48
2.1.1. Определение анионного состава воды 48
2.1.2. Получение накопительных культур 48
2.1.3. Количественный учёт 49
2.1.4. Выделение чистых культур и идентификация УОБ 50
2.1.5. Экспресс-метод определения полианионной природы межклеточного матрикса УОБ с цетавлоном 51
2.1.6. Получение поверхностной плёнки микромицета 52
2.1.7. Конструирование биопрепарата 52
2.1.8. Определение тяжёлых металлов и других токсичных химических элементов в биопрепарате 55
2.1.9. Определение эффективности очистки нефтезагрязнённой морской воды 56
2.1.9.1. Определение общего содержания углеводородов нефти методом ИК-спектроскопии 56
2.1.9.2. Определение содержания н-алканов методом ГХ—МС 57
2.1.9.3. Определение группового состава нефти методом жидкостной хроматографии 57
2.1.10. Экотоксикологическая оценка очищенной воды от нефти, культур ПАУОБ и разработанного биопрепарата методом биотестирования 59
2.1.11. Определение фотосинтетической активности микроводорослей спектральным методом 62
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ 63
2.2.1. Выделение и исследование ПАУОБ Балтийского моря 63
2.2.1.1. Анионный состав воды Балтийского моря 63
2.2.1.2. Количество УОБ в морской воде 63
2.2.1.3. Культивирование ПАУОБ 64
2.2.2. Конструирование биопрепарата, включающего выделенные бактерии на природном носителе-подкормке и сорбент для нефти 67
2.2.2.1. Конструкция разработанного биопрепарата «Морской снег» для очистки нефтезагрязнённых акваторий 67
2.2.2.2. Микромицеты, используемые в качестве носителей-подкормок ПАУОБ / УОБ и сорбента для нефти 71
2.2.2.3. Результаты количественного химического анализа биопрепарата «Морской снег» 72
2.2.3. Определение эффективности очистки нефтезагрязнённых акваторий разработанным биопрепаратом 73
2.2.3.1. Определение общего содержания нефти методом ИК-спектроскопии 73
2.2.3.2. Хроматограммы изменения н-алканов и их количество в нефтезагрязнённой и очищенной ПАУОБ морской воде 73
2.2.3.3. Изменение группового состава углеводородов в морской воде, очищенной ПАУОБ от нефтяного загрязнения 76
2.2.3.4. Результаты биотестирования очищенной морской воды на микроводорослях Dunaliella salina и Chlorella minutissima 77
2.2.3.5. Результаты биотестирования культур ПАУОБ на микроводорослях, salina и С. minutissima 80
2.2.3.6. Результаты биотестирования очищенной морской воды на ракообразных Artemia salina 82
2.2.3.7. Результаты биотестирования культур ПАУОБ на ракообразных A. salina 84
2.2.3.8. Результаты биотестирования биопрепарата «Морской снег» на микроводорослях С. minutissima и ракообразных Л. salina... 85
2.2.3.9. Определение фотосинтетической активности микроводорослей спектральным методом 86
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 89
ВЫВОДЫ 106
БЛАГОДАРНОСТИ 107
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 108
ПРИЛОЖЕНИЕ Экологический сертификат соответствия 124
