Введение
Глава 2. Обзор литературы 13
2.1 Строение и регенерация костной ткани 15
2.2 Развитие клеточных технологий для регенерации костной ткани 20
2.3 Характеристика и остеогенныи потенциал культур мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани 27
2.4 Матрицы-носители для тканеинженерных конструкций 35
2.5 Использование обогащенной тромбоцитами плазмы крови в тканевой инженерии 42
Глава 3. Материалы и методы 47
3.1 Выделение и культивирование мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани человека 47
3.2 Иммунофенотипический анализ мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани 48
3.3 Дифференцировка мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани человека 49
3.4. Получение и дифференцировка культур мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани крыс 54
3.5 Получение полилактидных матриц-носителей 54
3.6 Заселение и культивирование мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани человека на носителях 56
3.7 Оценка цитотоксичности материала носителей и пролиферативной активности клеток на носителях с помощью МТТ-теста 56
3.8 Визуализация клеток с использованием мембранной метки РКН26 57
3.9 Изучение морфологии клеток с помощью сканирующей электронной микроскопии 58
3.10 Получение обогащенной тромбоцитами плазмы крови 59
3.11 Изготовление тканеинженерных конструкций 59
3.12 Оценка жизнеспособности клеток внутри тканеинженерной конструкции in vitro 60
3.13 Трансплантация тканеинженерных конструкций крысам 60
3.14 Подготовка и обработка гистологических срезов 63
3.15 Статистический анализ данных 63
Глава 4. Результаты 65
4.1. Характеристика культур мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани 65
4.2 Выбор оптимальных условий остеогенной дифференцировки мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани человека 78
4.3 Оценка цитосовместимости матриц-носителей 87
4.4 Характеристика тканеинженерной конструкции 95
4.5 Морфологическое исследование области введения тканеинженерной конструкции в толщу мышечной ткани бедра крыс 98
Глава 5. Обсуждение 110
5.1 Выбор культуры остеогенных клеток 110
5.2 Обоснование выбора матриц-носителей 116
5.3 Получение тканеинженерных конструкций 120
5.4 Трансплантация тканеинженерных конструкций в бедренную мышцу крыс 124
Заключение 132
Выводы 136
Список литературы 138
