Введение
1. Обзор литературы 12
1.1 Жировая ткань. Структура и функционирование 12
1.1.1 Виды жировой ткани 12
1.1.2 Обновление жировой ткани 14
1.2 Мезенхимные стромальные клетки 18
1.2.1 История изучения и общие свойства 18
1.2.2 Участие МСК в регенерации тканей 21
1.3 Ренин-ангиотензиновая система 23
1.3.1 Классическое представление. Циркулирующая РАС 23
1.3.2 Рецепторы к Ang II. Строение и сигнализация 26
1.3.3 Локальные РАС. Влияние на метаболизм жировой ткани 32
2. Материалы и методы исследования 37
2.1 Выделение МСК из жировой ткани человека 37
2.2 Культивирование клеток 37
2.3 Иммунофлуоресцентное окрашивание ангиотензиновых рецепторов 38
in situ в жировой ткани и in vitro в культуре МСК 38
2.4 Проточная цитофлуориметрия и сортировка клеток 39
2.5 Ca2+-imaging 40
2.6 Выделение РНК, обратная транскрипция и ПЦР (ОТ-ПЦР) 41
2.7 Адипогенная дифференцировка 43
2.8 Обработка МСК Ang II и ингибиторами к компонентам РАС 44
2.9 Определение нейротрофической активности МСК 45
2.10 Получение кондиционированной среды МСК для протеомного анализа секретируемых факторов 46
2.11 Статистический обработка данных 46
3. Результаты исследования и их обсуждение 47
3.1 Экспрессия локальной РАС в МСК жировой ткани человека in vivo и in vitro 47
3.2 Влияние Ang II на адипогенную дифференцировку МСК жировой ткани 60
3.3 Влияние Ang II на секреторную активность МСК жировой ткани 65
Заключение 72
Выводы 73
Список научных работ, опубликованных по теме диссертации 74
Список литературы 76
Благодарности 95
