Введение
1. Следовые амины и рецепторы к следовым аминам (обзор литературы) 16
1.1. Следовые амины 16
1.2. Следовые амины как маркеры нейропсихических расстройств 18
1.3. Физиологические эффекты следовых аминов у позвоночных 20
1.4. Рецепторы к следовым аминам 23
1.4.1. Рецепторы к следовым аминам у беспозвоночных 23
1.4.2. Рецепторы к следовым аминам у позвоночных 24
1.4.3. Экспрессия TAAR 26
1.4.4. Внутриклеточная передача сигнала от TAAR 30
1.4.6. Физиологическое значение TAAR 38
1.5. Фармакологическое значение TAAR1 45
1.5.1. Шизофрения 45
1.5.2. Болезни лекарственной зависимости 48
1.5.3. Болезнь Паркинсона 51
1.5.4. Депрессия и тревожные расстройства 52
1.5.5. Заболевания с нарушениями импульсивно-компульсивного контроля 52
2. Материалы и методы исследования 54
2.1. Животные 54
2.2. Вещества 55
2.3. Методики для оценки влияния выключения TAAR1 на изменение функции дофаминергической системы у мышей 57
2.3.1. Оборудование 57
2.3.2. Опыты с апоморфином 58
2.3.3. Опыты с сочетанным введением D1- и D2- дофаминомиметиков 59
2.3.4. Исследование реактивности на стимулы, ассоциированные с действием амфетамина 60
2.4. Методики для оценки влияния выключения TAAR1 на изменение функции глутаматергической системы у мышей 63
2.4.1. Опыты с NMDA-антагонистами 63
2.4.2. Метод иммуноблота 63
2.5. Методики для доклинической оценки агонистов TAAR1 как потенциальных средств терапии СДВГ 64
2.5.1. Методики для оценки гиперактивности 64
2.5.2. Методики для оценки импульсивности 67
2.5.3. Методики для оценки активного внимания 72
2.5.4. Методики для оценки когнитивной гибкости 77
2.5.5. Дополнительные методики, использованные для фенотипирования DAT-KO крыс 78
2.6. Методики для оценки противокомпульсивного действия агонистов TAAR1 80
2.6.1. Полидипсия, обусловленная режимом подкрепления 80
2.6.2. Локомоторная активность 85
2.6.3. Оценка питьевого поведения 85
2.7. Выявление и проверка фармакологических свойств новых агонистов TAAR1 c in vivo активностью 86
2.7.1. Локомоторная активность 86
2.7.2. Полидипсия, обусловленная режимом подкрепления «фиксированный интервал 60 секунд» 87
2.8. Фенотипирование TAAR5-KO мышей 87
2.8.1. Общая оценка состояния животных и неврологическая проверка 87
2.8.2. Оценка температуры 88
2.8.3. Оценка локомоторной активности 88
2.8.4. Оценка социального поведения 90
2.8.5. Акустическая стартл-реакция и преимпульсное торможение 90
2.8.6. Оценка тревожности мышей 91
2.8.7. Оценка депрессивно-подобного поведения у мышей 91
2.8.8. Методы для оценки импульсивности 92
2.8.9. Специфические фармакологические тесты 93
2.9. Методы статистического анализа результатов 93
3. Влияние выключения TAAR1 на функцию дофамин- и глутаматергической системы у мышей 95
3.1. Опыты с апоморфином 95
3.1.1. Двигательная гипоактивность 95
3.1.2. Феномен «вертикализации» 97
3.1.3. Стереотипические реакции 100
3.1.4. Опыты с сочетанным введением D1- и D2- дофаминомиметиков 101
3.1.4. Обсуждение результатов 104
3.2. Исследование реактивности на стимулы, ассоциированные с действием амфетамина 107
3.2.1. Условно-рефлекторная гиперактивность и контекст-обусловленная сенситизация к стимулирующему действию амфетамина на двигательную активность 108
3.2.2. Условнорефлекторная реакция предпочтения места, ассоциированного с амфетамином 111
3.2.3. Обсуждение результатов 113
3.3. Влияние выключения TAAR1 на изменение функции глутаматергической системы у мышей 116
3.3.1. Опыты с NMDA-антагонистами 116
3.3.2. Экспрессия глутаматных рецепторов 117
3.3.3. Обсуждение результатов 119
4. Экспериментальное обоснование терапевтического потенциала агонистов TAAR1 на доклинических моделях синдрома дефицита внимания с гиперактивностью 123
4.1. Оценка антигиперактивного действия агонистов TAAR1 124
4.1.1. Фармакологические модели 124
4.1.2. Генетические модели 134
4.2. Оценка противоимпульсивного действия агонистов TAAR1 150
4.2.1. Влияние активации TAAR1 на ингибиторный контроль 150
4.2.2. Влияние активации TAAR1 на устойчивость к задержке подкрепления 161
4.2.3. Влияние активации TAAR1 на преждевременное принятие решений 165
4.3. Оценка влияния фармакологической активации TAAR1 на активное внимание у крыс 166
4.3.1. Тест распознавания зрительного стимула 166
4.3.2. Двухпедальный тест для оценки внимания 169
4.4. Экспериментальная оценка влияния фармакологической активации TAAR1 на когнитивную гибкость 171
4.4.1. Новый тест для оценки когнитивной гибкости у крыс 171
4.4.2. Опыты с RO5263397 182
4.5. Обсуждение результатов 182
5. Экспериментальное обоснование терапевтического потенциала агонистов TAAR1 на модели компульсивного поведения 190
5.1. Оценка противокомпульсивного действия агонистов TAAR1 190
5.1.1. Полидипсия, обусловленная режимом пищевого подкрепления «Фиксированное время 60 секунд» 190
5.1.2. Полидипсия, обусловленная режимом пищевого подкрепления «Фиксированный интервал 60 секунд» 192
5.1.3. Оценка действия RO5263397 на двигательную активность и потребление жидкости 195
5.1.4. Оценка толерантности к фармакологическим эффектам RO5263397 при повторном введении 198
5.2. Обсуждение результатов 202
6. Активность in vivo новых агонистов TAAR1 210
6.1. Опыты с MK-801 210
6.2. Моторные эффекты LK00764 213
6.3. Антигиперактивное действие LK00764 217
6.3.1. Гиперактивность, вызванная острым введением никотина 217
6.3.2. Двигательная гиперактивность DAT-KO крыс 218
6.4. Противокомпульсивное действие LK00764 218
6.5. Обсуждение результатов 220
7. Доклиническая оценка TAAR5 как потенциальной мишени для фармакотерапии нейропсихических расстройств 224
7.1. Общая оценка состояния животных 225
7.2. Проверка состояния дофамин- и глутаматергической нейропередачи 226
7.3. Оценка терморегуляции 229
7.4. Оценка серотонинергической нейропередачи 230
7.5. Исследование общей тревожности, формирования депрессивно-подобного поведения и импульсивности 234
7.5.1. Общая тревожность 234
7.5.2. Депрессивно-подобное поведение 236
7.5.3. Импульсивность 236
7.6. Обсуждение 238
Заключение 243
Выводы 252
Практические рекоммендации 254
Перечень сокращений и условных обозначений 255
Список литературы 258
