Введение
ГЛАВА I. Литературный обзор по проблеме исследований 12
1.1 : Методы получения трансформированных растений . 12
1.2. Краткая характеристика агробактериальных векторных систем 12
1.2.1. Структурно- функциональная организация Ті - плазмид 14
1.2.2. Методы агробактериальной трансформации растений 18
1.3. Методы прямого переноса генов в растения 19
1.4. Селекция трансформированных тканей растений 22
1.5. Экспрессия чужеродных генов и ее регуляция в трансгенных растениях 23
1.6.1. Регенерация растений плодовых культур 24
1.6.2. Агробактериальная трансформация растений плодовых культур 32 1.7. 1. Регенерация растений рода Rubus 35
1.7. 2. Трансформация растений рода Rubus с помощью Agrobacterium
tumefaciens 41
1.8. Генетическая стабильность регенерирующих побегов 43
ГЛАВА II. Методика и условия исследований 46
2.1. Характеристика объекта исследований 50
2.2. Методика трансформации табака 50 2.3 Строение используемых генетических конструкций 52
2.4. Методика получения регенерантов ремонтантной малины 53
2.5. Агробактериальная трансформация листовых эксплантов ремон
тантной малины 56
2.6 Методика выделения ДНК малины 57
2.7. Методика выделения плазмидной ДНК из агробактерии 57
2.8 Условия проведения полимеразной цепной реакции для анализа полученных регенерантов 58
2,9. Методика постановки чашечного теста для определения экспрес сии гена лихеназы 60
2.10 Методика выделения ДНК и РІЖ малины 61
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 63
3.1. Разработка условий регенерации на листовых эксплантах ремонтантной малины 63
3.2. Изучение генетической однородности полученных регенерантов ремонтантной малины 83
3.3. Разработка метода трансформации ремонтантной малины 89
3.3.1 .Освоение методики трансформации на табаке 89
3.3.2. Подбор оптимальных условий агробактириальной трансформации
ремонтантной малины 91
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 111
Выводы и практические рекомендации 113
Список использованной литературы 115
