Введение
1. Оглавление 2
2. Список сокращений 4
3. Введение 6
3.1. Актуальность исследования 6
3.2. Цель и задачи настоящего исследования 12
3.3. Научная новизна 12
3.4. Теоретическая и практическая значимость работы 14
4. Обзор литературы 15
4.1. Оксид азота 15
4.2. Основные этапы изучения оксида азота 15
4.3. Физико-химические характеристики оксида азота 17
4.4. Синтез NO 17
4.4.1 NO - синтазный путь 17
4.4.2. Несинтазный путь синтеза N0 19
4.5. Активные метаболиты N0 в крови 21
4.5.1. Нитрозотиолы 23
4.5.2. Нитрозильные комплексы железа 26
4.5.3. NO и гемоглобин 27
4.5.4. Пероксинитрит 29
4.5.5. NO модифицированные белки 31
4.6. Окисление N0 внутри гидрофобной фазы 33
4.7. Изменения метаболизма N0 в условиях 3ишемии/реперфузии
4.7.1. Ишемия/реперфузия 35
4.7.2. Продукция N0 во время ишемии/реперфузии 39
4.7.3. Значение активных форм кислорода и пероксинитрита в ишемии/реперфузии миокарда
4.7.4. Современные терапевтические подходы 43
4.8. Заключение 48
Материалы и методы исследования 50
5.1. Определение коэффициента распределения NO (QNO) 50
5.2. Определение тиолов и нитрозотиолов 53
5.3. Определение нитротирозина в клетках миокарда методом Вестерн-блот анализа
5.5. Хирургическая подготовка животных 54
5.5.1. Моделирование регионарной ишемии/реперфузии миокарда
5.6. Оценка размеров зоны некроза 56
5.7. Экспериментальный протокол 57
5.7.1. Изучение влияния альбумина и нитрозотиолов на гемодинамические параметры
5.7.2. Изучение влияния «Перфторана» на синтез нитрозотиолов и гемодинамические параметры
5.7.3. Изучение влияния «Перфторана» на размер зоны некроза и уровня нитротирозина в зоне ишемии при ишемии/реперфузии миокарда
5.8. Статистическая обработка результатов 61
6. Результаты 62
6.1. Ускорение реакции окисления оксида азота альбумином плазмы
6.2. Катализ образования низкомолекулярных нитрозотиолов (LMW RSNO) под действием альбумина 64
6.3. Механизм катализа образования LMW RSNO под действием альбумина 66
6.4. Альбумин как депо NO in vivo 69
6.5. Мицеллярный катализ образования LMW RS-NO in N vitro и регуляция артериального давления 72
6.6. Ускорение окисления N0 внутри мицелл перфторуглеводородов 74
6.7. Катализ образования LMW RS-NO под действием 76 PFC in vitro
6.8. PFC как способ изоляции плазменного NO in vivo 77
6.9. Катализ образования LMW RS-NO под действием PFC in vivo и регуляция уровня артериального давления 79
6.10. Роль NO в развитии повреждений миокарда при ишемии/реперфузии 84
7. Обсуждение результатов 89
7.1. Гидрофобная фаза альбумина и «Перфторана» как способ влияния на уровень NO и нитрозопроизводных плазмы 89
7.2. Гидрофобная фаза «Перфторана» как способ снижения повреждения клеток миокарда во время ишемии/реперфузии 95
6. Выводы 98
7. Список литературы 100
