Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1. Клеточный цикл 12
1.2. Регуляция клеточного цикла 13
1.3. Система контроля клеточного цикла. Контрольные точки 17
1.4. Универсальный ингибитор клеточного цикла белок р21 19
1.5. Структура и регуляция активности р21 22
1.6. Регуляции экспрессии гена Cdknla (р21) 24
1.7. Белок р53 как опухолевый супрессор и основной регулятор транскрипции гена Cdknla (р21) 26
1.8. Белок FoxOl осуществляет контроль соблюдения баланса между пролиферацией и доступностью питательных веществ через регуляцию экспрессии Cdknla (р21)32
1.9. Структура и регуляция активности рецептора CAR 37
1.10. Участие рецептора CAR в стимуляции деления клеток и подавлении апоптоза
ГЛАВА 2. Материалы и методы 46
2.1. Материалы 46
2.2. Методы исследования
2.2.1. Обработка животных индукторами 48
2.2.2. Выделение микросом печени животных 48
2.2.3. Определение каталитической активности сур2Ь 49
2.2.4. Приготовление лизатов из клеток печени 49
2.2.5. Выделение ядерных экстрактов из клеток печени 50
2.2.6. Вертикальный электрофорез белков в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях 50
2.2.7. Полусухой электроперенос белков на нитроце ллю лозную мембрану 50
2.2.8. Иммунохимический анализ белков 50
2.2.9. Иммунопреципитация хроматина 2.2.10. Выделение суммарной клеточной РНК и получение кДНК 53
2.2.11. ПЦР с детекцией в реальном времени 54
2.2.12. Статистическая обработка результатов 55
ГЛАВА 3. Результаты 56
3.1. Активация рецептора CAR под действием ТСРОВОР 56
3.2. Активация рецептора CAR приводит к увеличению массы печени грызунов58
3.3. Следствием активации рецептора CAR является снижение содержания ингибитора клеточного цикла белка р21 в клетках печени 60
3.4. Снижение функциональной активности транскрипционного фактора р53 при активации рецептора CAR 62
3.5. Подавление функциональной активности транскрипционного фактора Foxol под действием активированного рецептора CAR 64
3.6. Следствием активации CAR является увеличении экспрессии белков-регуляторов клеточного цикла 70
Глава 4. Обсуждение результатов 72
Выводы 82
Список цитируемой литературы 83
