Введение
Введение 4
Обзор литературы. Структура и механизм действия пиридиксальфосфат зависимых лиаз 5
Классификация и реакционная специфичность пиридоксаль-фосфат зависимых лиаз 6
Пространственное строение пиридоксаль-5-фосфат-зависимых лиаз 10
Каталитический механизм пиридоксаль-5-фосфат-зависимых лиаз 25
Роль отдельных аминокислотных остатков в механизме пиридоксаль-фосфат-зависимых лиаз 28
Результаты и их обсуждение
Введение 51
Очистка триптофаназы и спектральные свойства фермента 55
Факторы, определяющие субстратную специфичность триптофаназы 63
Роль остатка аргинина 226 в механизме действия триптофаназы 66
Роль остатка тирозина 72 в механизме действия триптофаназы 72
Роль остатков аспарагиновой кислоты 133 и гистидина 458 в механизме действия триптофаназы 78
Выводы 96
Методы исследования
Выращивание бактериальных масс, выделение и очистка ферментов 97
Определение концентрации белка 98
Определение активности ферментов 99
Определение чистоты выделенных ферментов 99
Кинетические исследования 99
Спектральные исследования ферментов 102
Получение апофермента 103
Определение константы диссоциации пиридоксаль-фосфата 103
Идентификация продуктов побочной реакции трансаминирования 104
Список цитированной литературы
