Введение
2. Обзор литературы. 8
2.1. Апоптоз. 8
2.1.1. Основные морфологические черты апоптоза. 8
2.1.2. Биохимические механизмы апоптотической гибели . 13
2.1.3. Активация и регуляция каспазного каскада. 17
2.2 Участие онкобелка Мус в регуляции апоптоза. 22
2.3. Защитные системы опухолевых клеток. 31
2.4. Белки теплового шока. 33
2.4.1. Белки теплового шока и их классификация . 33
2.4.2. Семейство белков Hsp70 и его функции. 35
2.4.3. Роль Hsp70 в процессе апоптоза. 41
3. Материалы и методы. 48
3.1. Клеточные линии и их культивирование. 48
3.2. Тепловое воздействие и индукция синтеза Hsp70. 49
3.3. Трансфекция клеток. 49
3.4. Анализ ядерной локализации MycER после индукции ОНТ. 50
3.5. Индукция и оценка апоптоза. 50
3.6. Анализ кинетики каспазной активности. 50
3.7. Антитела. 51
3.8. Анализ фрагментации клеточной ДНК. 51
3.9. Анализ транслокации цитохрома с. 52
3.10. Коиммунопреципитация и лиганд-блоттинг. 53
3.11. Выделение и очистка белков теплового шока семейства 70 кДа. 55
3.12. Статистическая обработка. 56
4. Результаты. 57
4.1. Тепловой шок снижает чувствительность опухолевых клеток с высоким содержанием Мус к действию противоопухолевых препаратов.
4.2. Hsp70 повышает устойчивость клеток с высокой экспрессией Мус к действию противоопухолевых препаратов . 60
4.3. Молекулярные механизмы подавления Мус-опосредованного апоптоза. 63
4.4. Процесс апоптоза, инициированный v-Myc, специфически подавляется ингибитором каспазы 9. 65
4.5. Hsp70 регулирует активность эффекторных каспаз, но не влияет на высвобождение цитохрома с из митохондрий. 66
4.6. Hsp70 физически взаимодействует с каспазой 3 и каспазой 7. 68
5. Обсуждение. 72
6. Выводы. 82
7. Список литературы. 83
