Введение
I. Литературный.обзор II
1.1. Морфология слизистой оболочки желудка лягушки и ультраструктура оксинтных клеток II
1.2. Краткие сведения о механизме образования и транспорта протонов в слизистой желудка 19
1.2. Карбоангидразная гипотеза 19
1.2.2. Редокс-гипотеза . . 21
1.2.3. АИ-АТФазная гипотеза 23
1.3. Пути регуляции секреции соляной кислоты 26
1.4. Секреция соляной кислоты слизистой оболочкой желудка и роль в этом процессе цАМФ 32
1.4.1. Аденилатциклазная система 34
1.4.2. Краткая характеристика фосфодиэстеразы 38
1.4.3. ЦАМФ-зависимые протеинкиназы 39
1.5. Фосфорилирование белков, как один из основных путей реализации физиологической функции гормонов . 43
1.6. Роль ионов калия и кальция в обеспечении регуляции секреции соляной кислоты слизистой желудка . 47
II. Методическая часть 51
2.1. Реактивы, растворы- 51
2.2. Получение изолированной слизистой оболочки желудка лягушки 53
2.3. Выделение изолированных оксинтных клеток 54
2.3.1. Выделение оксинтных .клеток ферментативной обработкой СОЖ 54
2.3.2. Окраска оксинтных клеток на сукцинатдегидрогеназу 55
2.4. Изучение секреции МОЇ изолированной СОЖ и изолированными оксинтными клетками с помощью рН-статического метода .- 56
2.4.1. Устройство рН-стата 56
2.4.2. Работа гастро-рН-стата 59
2.4.3. Регистрация и обработка результатов 61
2.5. Определение циклических нуклеотидов (цАМФ и цГШ) в ткани . - 63
2.5.1. Выделение циклических .нуклеотидов-из ткани и подготовка материала к анализу 63
2.5.2. Определение циклических нуїдіеотидов по методу Гил-мана 64
2.6. Метод изучения включения (с^Р)-ортофосфата в белки изолированных оксинтных клеток 64
2.7. Метод фракционирования цАМФ-зависимых и цАМФ-неза-висимых протеинкиназ .изолированных оксинтных клеток 65
2.7.1. Фракционирование протеинкиназ . 65
2.7.2. Определение активности протеинкиназ . 66
2.8. Статистическая обработка экспериментальных данных 67
III. Результаты , - 68
3.1. Секреторная активность, уровень цАМФ и цГМФв изолированной СОЖ лягушки 68
3.2. Влияние гистамина и циметидина на уровень секреции НСІ изолированной СОЖ *. 70
3.3. Влияние циклических нуклеотидов, З-тизобутил-1-метил-ксантина на уровень секреции НСІ изолированной СОЖ 74
3.4. Влияние метаболитов (пирувата, сукцината) на секрецию соляной кислоты изолированной СОЖ 77
3.5. Влияние циклогексимида на секрецию НСІ изолированной СОЖ 79
3.6. Регуляция секреции HCI изолированной СОЖ лягушек
в зимнем и летнем периодах 80
3.7. Влияние ионов .калия и кальция на уровень секреции НСІ изолированной СОЖ 85
3.8. Влияние гистамина и циметидина на содержание циклических нуклеотидов в изолированной СОЖ 91
3.9. Исследование влияния модификаторов секреции на изолированные оксинтные клетки желудка .лягушки 96
3.9.1. Выделение изолированных оксинтных клеток 96
3.9.2. Влияние специфических агентов на регуляцию секреции НСІ изолированными оксинтными клетками 97
3.9.3. Влияние гистамина и циметидина на уровень циклических нуклеотидов и фосформирование белков изолированных оксинтных клеток 99
3.10. Изучение гетерогенности протеинкиназ в изолиро ванных оксинтных клетках желудка лягушки 105
IV. Обсуждение результатов . 109
V. Выводы 123
VI. Список литературы 124
