Введение
Глава 1 Современное состояние лабораторной диагностики и пути расширения арсенала методов идентификации лептоспир 15
1.1 Распространение лептоспир, взаимодействие с факторами внешней среды и живыми организмами 15
1.2 Лабораторные методы выделения, культивирования и идентификации лептоспир 20
1.3 Методы получения и применения иммуносорбционных систем для выявления бактерий 34 Собственные исследования 42
Глава 2 Материалы и методы 42
2.1 Материалы 42
2.1.1 Штаммы микроорганизмов 42
2.1.2.Питательные среды и условия культивирования 42
2.1.3 Лабораторные животные 42
2.1.4 Клинический материал 47
2.1.5 Характеристика реагентов, используемых для получения иммуно-сорбентов 47
2.2 Методы исследования 47
2.2.1 Микроскопия лептоспир 47
2.2.2 Получение антигенных комплексов микроорганизмов 48
2.2.3 Иммунизация животных 48
2.2.4 Выделение иммуноглобулинов 49
2.2.5 Методы контроля специфичности и активности антигенов и сывороток 49
2.2.6 Получение иммунофлуоресцирующих конъюгатов 49
2.2.7 Экстракция фосфолипидов (ФЛ) 49
2.2.8 Получение и контроль липосом 50
2.2.9 Получение и контроль иммуноферментных конъюгатов 51
2.2.10 Физико-химические методы 51
2.2.11 Иммунохимические методы анализа 52
2.2.12 Лиофилизация биологического материала 52
2.2.13 Методы математической и статистической обработки материалов 52
Глава 3 Усовершенствование экспресс-диагностики лептоспирозной инфекции путем разработки иммобилизованных препаратов с магнитными свойствами и конструирования технических средств 54
3.1 Получение высокоспецифичной лептоспирозной сыворотки 54
3.2 Разработка лептоспирозных магноиммуносорбентных препаратов для выявления лептоспирозных антител, антигенов и компоновка тест-систем для выявления лептоспир 64
3.3 Мониторинг объектов внешней среды на наличие лептоспир с применением технических средств 74
Глава 4 Выявление лептоспир с использованием липосомально-иммунопероксидазного конъюгата и суспензионного диагностикума 79
4.1 Получение и тестирование лептоспирозного липосомально-иммунопероксидазного конъюгата 84
4.2 Получение суспензионного диагностикума и проведение анализа суспензионной агглютинации лептоспир 87
4.2.1 Получение суспензионного диагностикума 87
4.2.2 Проведение анализа суспензионной агглютинации лептоспир 92
Глава 5 Исследование клинического и полевого материала на наличие антител и антигена лептоспир 97
5.1 Изучение диагностической ценности предложенных тест-систем при исследовании клинического материала 97
5.2 Апробация разработанных тест-систем и технических устройств при исследовании полевого материала 105
Заключение
Выводы 126
Практические рекомендации 127
Список используемых источников 129
