Введение
1. Литературный обзор 8
1.1. Золотистый стафилококк и его характеристика 8
1.2. Стафилококковые и сопутствующие инфекции у животных, в сырье и продуктах животного происхождения 10
1.3. Методы диагностики золотистого стафилококка и сопутствующих инфекций бактериальной и вирусной природы .. 15
2. Собственные исследования 25
2.1. Цель и задачи исследования 25
2.2. Объекты и методы исследований 26
2.2.1. Микробиологические методы определения Staphylococcus aureus в биоматериале 26
2.2.2. Выделение и очистка ДНК из бактерий 27
2.2.3. Включение биотина в ДНК методом ник-трансляции 28
2.2.4. Получение меченых ДНК-зондов с помощью полимеразной цепной реакции 29
2.2.5. Методика идентификации бактерий точечной ДНК-гибридизацией на мембранных фильтрах с биотинилированными ДНК-зондами 30
2.2.6. Методика идентификации парвовируса с применением тест-системы «ПАРВОВИР» 32
2.2.7. Методика определения стафилококковых и сопутствующих инфекций на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией 38
2.2.8. Методика определения антигенов парвовируса собак с использованием тест-набора SNAP Parvo 39
2.2.9. Методика выявления антигенов парвовирусного энтерита собак иммуноферментным анализом 41
2.2.10. Статистическая обработка результатов 46
2.3. Результаты исследований
2.3.1. Результаты мониторинговых исследований по выявлению Staphylococcus aureus и сопутствующих инфекций в биоматериале животных, в мясном сырье и субпродуктах 46
2.3.2. Разработка и совершенствование методик определения Staphylococcus aureus и сопутствующих инфекций в мясном сырье, субпродуктах и биоматериале животных на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией 48
2.3.3. Усовершенствование определения парвовируса в биоматериале с использованием тест-системы IDEXX SNAP...58
2.3.4. Разработка методики ускоренной индикации Staphylococcus aureus в сырье животного происхождения на основе точечной гибридизации со специфичными ДНК-зондами 63
2.3.5. Сравнительный анализ микробиологических методов и методов ДНК-диагностики по выявлению Staphylococcus aureus в биоматериале животных, в сырье и субпродуктах животного происхождения 69
Обсуждение результатов 72
Выводы 81
Предложения для практики 83
Список литературы 84
Приложение 101
