Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Структура и метаболизм уридина и уридиновых пуклеотидов (УМФ, УДФ, УТФ) в организме млекопитающих 13
1.2. Рецепторный механизм действия УТФ и УДФ 17
1.3.Фармакологические эффекты уридина и уридиновых пуклеотидов (УМФ, УДФ и УТФ) 18
1.4. Метаболизм уридина и его пуклеотидов в миокардиалыюй ткани 19
1.4.1. Включение экзогенного уридина в сердце при пормоксии и ишемии в опытах in vitro и in vivo 21
1.5. Энергетический метаболизм миокарда в условиях пормоксии и ишемии 23
1.5.1. Реперфузионное повреждение миокарда 29
1.5.2. Постишемическая дисфункция миокарда (миокардиальный станшшг) 29
1.5.3. Постишемическне и реперфузионные аритмии .36
1.6. Механизмы повышения устойчивости миокарда к ишемии 40
1.6.1. Ишемическая адаптация миокарда (прекопдиционнрование) 40
1.6.2. Структурная организация и регуляция АТФ-зависимых калиевых каналов (цитоплазматического и митохондриального) 42
1.6.3. Основное физиологическое значение МИТОКДТФ каналов 45
1 6.4. Роль цитоплазматического и митохондриалыюго КАТФ каналов в обеспечении устойчивости к пшоксии 47
1.6.5. Эндогенные биологически активные вещества активаторы МИТОКДТФ каналов 49
Глава 2. Материалы и методы исследования 52
2.1.Животные 52
2.2. Вещества 52
2.3. Изучение острой,токсичности и широты терапевтического действия уридина, УМФ, УДФ, УТФ 53
2.4. Оценка кардиоваскулярных эффектов уридина и его пуклеотидов у иптактпых крыс 53
2.5. Острая регионарная и тотальная ишемия сердца крыс (in vitro) 53
2.5.1. Получение препаратов изолированного перфузируемого сердца 53
2.5.2. Модель регионарной ишемии 54
2.5.3. Модель тотальной ишемии 54
2.5.4.0пределение параметров сократительной функции сердца 55
2.5.5. Определение нарушений сердечного ритма 55
2.6. Экспериментальный инфаркт миокарда 56
2.6.1. Моделирование острого инфаркта миокарда 56
2.6.2. Оценка антиишемического действия уридина и его пуклеотидов 57
2.6.2.1. Определение амплитуды Т-волны на ЭКГ 57
2.6.2.2. Определение объема повреждения миокарда 57
2.6.2.3. Определение нарушений сердечного ритма 58
2.6.3. Оценка энергетического обмена в миокарде 58
2.6.3.1. Определение содержания молочной кислоты 58
2.6.3.2. Определение содержания нировиноградной кислоты 59
2.6.3.3. Определение содержания креатинфосфата (КФ) 60
2.6.3.4. Определение содержания гликогена - 61
2.7. Модель энергозависимого набухания митохондрий 62
2.7.1. Выделение митохондрий сердца крысы 62
2.7.2. Определение энергозависимого входа калия в изолированные митохондрии 63
2.8. Модель бислойной липидной мембраны (БЛМ), реконструированной митохондриальным АТФ зависимым каналом 64
2.8.1. Выделение митохондрий печени крысы 64
2.8.2. Выделение митопластов из митохондрий печени крысы 64
2.8.3. Выделение и очистка К -транспортирующсго белка 64
2.8.4. Реконструирование -транспортирующего белка в БЛМ 65
2.9. Статистическая обработка результатов 66
Глава 3. Результаты исследований 67
3.1. Кардиоваскулярные эффекты уридина, УМФ, УДФ и УТФ у интактных животных 67
3.1.1. Влияние уридина, УМФ, УДФ и УТФ на сердечный ритм 67
3.1.2. Влияние уридина, УМФ, УДФ и УТФ па среднее артериальное давление 69
3.2. Действие уридина и уридшювых пуклеотидов на сократительную способность изолированных нерфузируемых сердец крыс при регионарной ишемии 71
3.3. Влияние уридина, УМФ, УДФ и УТФ па сократительную функцию левого желудочка и коронарный ток при реперфузии изрлированного сердца крысы после тотальной ишемии 77
3.4. Действие уридина и уридшювых пуклеотидов па нарушения сердечного ритма в экспериментах in vitro 82
3.4.1. Влияние уридина, УМФ, УДФ и УТФ на развитие ранних постокклюзионных аритмий 82
3.4.2. Влияние уридина, УМФ, УДФ и УТФ на развитие ренерфузионных аритмий 84
3.5.Кардиопротекторное действие уридина и его пуклеотидов в остром периоде экспериментального инфаркта миокарда у крыс 88
3.5.1. Антиишемический эффект уридина, УМФ, УДФ и УТФ 88
3.5.2. Антиаритмический эффект уридина, УМФ, УДФ и УТФ 91
3.6. Влияние уридина и его нуклеотидов на активность митохондри ального АТФ-зависимого К канала изолированных митохондрий кардиомиоцитов и активность каналообразующей субъединицы митохондриального АТФ-зависимого К канала в модельной системе 95
3.7. Зависимость кардиопротекторных эффектов уридина и УМФ от активности АТФ-зависимых К каналов у крыс с острым инфарктом миокарда 100
3.7.1. Влияние ингибиторов АТФ-зависимых К каналов на антиишемическую активность уридина и УМФ 100
3.7.2. Влияние ингибиторов АТФ-зависимых К каналов на антиаритмическую активность уридина иУМФ 104
3.8. Влияние УМФ и УТФ на энергетический обмен в миокарде 109
3.8.1. Определение биохимических показателей в ткани сердца 109
3.9. Изучение острой токсичности и широты терапевтического действия уридина, УМФ, УДФ и УТФ 113
Обсуждение результатов 115
Список литературы 129
