Введение
ГЛАВА I. Секретируемые белки бактерий и особенности их биосинтеза 8
1. Секретируемые белки бактерий 8
2. Особенности биосинтеза секретируемых белков II
3. Природа предшественников секретируемых белков 14
ГЛАВА II. Щелочная фосфатаза E.coli - секретируемнй фермент. 23
1. Структура и свойства щелочной фосфатази 23
2. Особенности биосинтеза щелочной фосфатази, как мембраносвязанного процесса 30
ЭКСЖРИМЕНТАЛШАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА III. Методы исследования 35
1. Используемый штамм и его свойства 35
2. Условия выращивания культуры 35
3. Получение растворимой фракции и мембран 36
4. Солюбилизация мембраносвязанной щелочной фосфатази различными агентами 37
5. Выделение и очистка периплазматической и мембраносвязанной щелочной фосфатазы 38
6. Разделение множественных форм перишіазглатической щелочной фосфатазы 40
7. Электрофоретические системы . .41
8. Определение молекулярной массы щелочной фосфатази с помощью гельфильтрации на сефадексе С-200 43
9. Снятие ультрафиолетовых спектров 43
10. Хроматография на октил-сефарозе .43
11. Обратимая денатурация щелочной фосфатазы 44
12. Взаимодействие щелочной фосфатазы с искусственными фосфолипидными мембранами
13. Аналитические методы 45
14. Реактивы 48
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА ІV. Выделение и очистка перишіазматической и мембраносвязанной щелочной фосфатазы E«coli 50
1. Выбор оптимальных условий для солюбилизации мембраносвязанной щелочной фосфатазы 51
2. Выделение и очистка перишіазматической и мембраносвязанной щелочной фосфатазы
3. Разделение множественных молекулярных форм перишіазматической щелочной фосфатазы 57
ГЛАВА V. Сравнительное иззгчение некоторых физико-химических и кинетических свойств мембраносвязанной и перишіазматической щелочной фосфатазы Е. coli 62
1. Молекулярная масса 63
2. Ультрафиолетовые спектры 68
3. Оптимум рН . 70
4. Влияние температуры, ионной силы и катионов металлов 72
5. Субстратная специфичность и ингибирование 77
6. Амфифильные свойства 86
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .III
ЛИТЕРАТУРА 117
