Введение
Глава 1. Перспективы использования методов тканевой инженерии для лечения стенозов трахеи (обзор литературы) 16
1.1 Современные способы лечения стенозов трахеи 16
1.2 Тканевая инженерия как новый подход к лечению заболеваний 24
1.3 Основные типы клеток, используемые в тканевой инженерии трахеи 33
1.4 Способы воздействия на функциональную активность клеток для усиления регенеративных процессов 39
1.5 Резюме 43
Глава 2. Материалы и методы 45
2.1 Экспериментальное исследование на животных 45
2.1.1 Получение тканеинженерной конструкции трахеи 45
2.1.2 Модель гетеротопической имплантации тканеинженерной конструкции трахеи .46
2.1.3 Модель ортотопической имплантации тканеинженерной конструкции трахеи 46
2.2 Про-ретроспективный анализ историй болезни пациентов со стенозами трахеи 48
2.2.1 Ретроспективный анализ различных вариантов хирургического лечения пациентов со стенозами трахеи 48
2.2.2 Характеристика пациентов, включенных в протокол клинического исследования «Трансплантация тканеинженерной трахеи» 48
2.3 Протокол оперативного вмешательства 49
2.4 Выделение мононуклеарных клеток из костного мозга 50
2.5 Получение тканеинженерной конструкции на основе синтетического каркаса и недифференцированных мононуклеарных клеток костного мозга 50
2.6 Исследования в до- и послеоперационных периодах 52
2.7 Исследование жизнеспособности клеток 53
2.8 Дифференциальное окрашивание живых и мертвых клеток 54
2.9 Морфологический анализ 55
2.10 Цитоморфологический анализ 56
2.11 Исследование мобилизации стволовых клеток 56
2.11.1 Выделение мононуклеарных клеток из периферической крови 56
2.11.2 Введение препаратов для стимуляции стволовых клеток 57
2.11.3 Иммунофенотипирование мононуклеарных клеток 57
2.11.4 Определение уровня цитокинов в периферической крови 59
2.11.5 Общеклинические лабораторные исследования 60
2.12 Статистический анализ 60
Глава 3. Результаты экспериментальных исследований биологической совместимости тик трахеи in vivo на лабораторных приматах 62
3.1 Характеристика животных 62
3.2 Биологическая совместимость ТИК с мезенхимальными стволовыми клетками 63
3.3 Результаты хирургического эксперимента in vivo 64
3.4 Резюме 67
Глава 4. Результаты клинического исследования тканеинженерного подхода в лечении стенозов трахеи 68
4.1 Анализ результатов различных вариантов хирургического лечения пациентов со стенозами трахеи и разработка критериев их отбора для включения в протокол клинического исследования 68
4.2 Биологическая совместимость тканеинженерного синтетического каркаса с аутологичными мононуклеарными клетками 72
4.2.1 Количественный и качественный анализ мононуклеарных клеток, выделенных из костного мозга 72
4.2.2 Жизнеспособность клеток, засеянных на синтетический каркас трахеи 73
4.3 Морфофункциональная характеристика тканеинженерной конструкции трахеи 75
4.3.1 Гистологическое строение и иммуногистохимическое описание тканеинженерной конструкции трахеи 75
4.3.2 Цитоморфологические изменения клеток на синтетическом каркасе in vivo .77
4.4 Мобилизация стволовых клеток и биологически активные вещества 78
4.4.1 Изучение мобилизации стволовых клеток под действием стимулирующей терапии 78
4.4.2 Исследование динамики цитокинов, молекул адгезии и факторов роста у пациентов в послеоперационном периоде 84
4.5 Резюме 88
Глава 5. Обсуждение полученных результатов 90
Заключение 107
Перспективы дальнейшей разработки темы 108
Выводы 108
Литература 110
