Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. АЗП как представитель лектинов злаковых 9
1.1.1. Общие сведения о лектинах 9
1.2.1. Структура и физико-химические свойства АЗП 10
1.1.1. Функции АЗП 12
1.1.3.1. Участие АЗП в гормональной регуляции ростовых процессов растений пшеницы
1.1.3.2. Участие АЗП в формировании ассоциативных 15
взаимоотношений пшеницы с азотфиксирующими бактериями
1.1.3.3. Защитные функции АЗП 17
1.1.3.4. Участие АЗП в ответе пшеницы на абиотический стресс 18
1.2. Защитные механизмы растений в ответ на действие токсических 21
ионов кадмия
1.2.1. Проникновение кадмия и его распределение в органах и тканях растений
1.2.2. Механизмы токсического действия кадмия на растения 25
1.2.3. Сигналинг 29
1.2.4 Регуляция гомеостаза 31
Экспериментальная часть
2. Материалы и методы 37
2.1. Объект исследования 37
2.2. Постановка опытов при воздействии ацетата кадмия 37
2.3. Определение митотического индекса в клетках зоны меристемы корней пшеницы
2.4. Определение содержание свободных фитогормонов и АЗП 38
2.4.1. Экстрагирование фитогормонов и лектина из одной з
растительной навески
2.4.2. Метод ИФА для оценки содержания лектина и фитогормонов 39
2.5. Иммунолокализация АБК и АЗП 40
2.6. Локализация кадмия в клеточных стенках тканей корней растений 41
2.7. Отложение лигнина в клеточных стенках 42
2.8. Определение концентрации кадмия 42
2.9. Определение концентрации активных форм кислорода 43
2.10. Определение активности супероксиддисмутазы 43
2.11. Определение активности пероксидазы 44
2.12. Оценка гистохимического распределения H2O2 и пероксидазы 45
2.13. Определение содержания малонового диальдегида 45
2.14. Выделение и очистка РНК из растений 45
2.15. Полимеразная цепная реакция 46
2.16. Реакция обратной транскрипции РНК и полуколичественный 47
анализ транскрипции генов
2.17. Электрофорез фрагментов ДНК в агарозном геле 47
3. Результаты исследований и их обсуждение 49
3.1. Влияние ацетата кадмия на рост и гормональный статус проростков пшеницы и количественный уровень АЗП в них Рост 49
Гормональный статус 54
Экспрессия АЗП в корнях проростков пшеницы 57
Экскреция лектина в наружную среду 61
3.2. Проявления защитного действия АЗП на растения пшеницы в 63
условиях кадмиевого стресса
3.2.1. Влияние предобработки АЗП на рост и гормональный статус 63
растений пшеницы при стрессе
3.2.2. Ко-иммунолокализация АЗП и АБК в тканях корней 4-сут 69
проростков пшеницы, подвергнутых воздействию кадмия
3.2.3. Влияние предобработки АЗП на состояние проантиоксидантного статуса проростков при кадмиевом стрессе
3.2.4. Влияния АЗП на отложение лигнина в базальной части корней в условиях кадмиевого стресса и распределение токсических ионов по тканям
3.3. Вклад АЗП в индуцированной салициловой кислотой устойчивости пшеницы к токсическому действию ионов кадмия
Заключение 93
Выводы 98
Список литературы
