Введение
Глава 1. Обзор литературы. Современные представления о серотониновых рецепторах мозга и их участии в регуляции генетически детерминированного защитного поведения 12
1.1. Семейство серотониновых рецепторов 14
1.1.1. 5-НТ] рецепторы 17
1.1.2. 5-НТ2 рецепторы 18
1.1.3. 5-НТ3 рецепторы 19
1.1.4. 5-НТ4 рецепторы 20
1.1.5. 5-ht5 и 5-ht6 рецепторы 20
1.1.6. 5-НТ7 рецепторы 21
1.2. Генетический контроль 5-НТы рецептора 22
1.2.1. Структура гена и кодируемого им рецептора 23
1.2.2. Методы исследования гена и рецептора 28
1.2.2.1 Методы измерения уровня мРНК 28
1.2.2.2 Методы контроля влияния геномной ДНК на амплификацию 33
1.2.2.3. ОТ-ПЦР 5-НТ 1Арецепторов 34
1.2.2.4. Методы исследования 5-НТ)Арецепторов 35
1.3. 5-НТ 1А рецепторы в регуляции защитного поведения 36
1.3.1. Защитное поведение 38
1.3.2. Межсамцовая агрессия 40
1.3.3. Агрессия, направленная на человека 43
1.3.4. Реакция замирания (каталепсия) 45
1.3.5. Зимняя спячка 48
Глава 2. Материалы и методы 54
2.1. Животные 54
2.2. Определение функциональной активности 5-НТiA рецепторов 57
2.3. Определение экспрессии гена, кодирующего 5-HTjА рецептор 60
2.3.1. Реактивы 60
2.3.2. Праймеры 60
2.3.3. Стандарты 63
2.3.4. Выделение общей РНК 64
2.3.5. Проверка общей РНК на присутствие геномной ДНК 64
2.3.6. Обратная транскрипция 65
2.3.7. Полимеразная цепная реакция 65
2.3.8. Проверка кДНК на присутствие геномной ДНК 66
2.3.9. Рестрикционный анализ 67
2.3.10. Электрофорез 67
2.4. Определение нуклеотидной последовательности методом Сэнгера 68
2.4.1. Очистка ДНК при помощи гель-фильтрации на колонках 69
2.4.2. Очистка продуктов ПЦР и реакции Сэнгера переосаждением изопропанолом 69
2.5. Статистическая обработка данных 70
Глава 3. Результаты исследования 71
3.1. Количественный метод определения экспрессии гена, кодирующего 5-НТ1А рецептор 71
3.1.1. Верификация праймеров, специфичных для гена 5-HTIA рецептора 71
3.1.2. Содержание геномной ДНК в образцах общей РНК и в образцах кДНК 73
3.1.3. Доказательства адекватности разработанного метода 75
3.2. Функциональная активность 5-HTJA рецепторов и экспрессия их гена у высокоагрессивных и неагрессивных животных 78
3.2.1. Крысы-пасюки, селекционированные на высокую агрессивность по отношению к человеку (defensive aggression) и ее отсутствие 78
3.2.2. Мыши с генетическим нокаутом моноаминоксидазы A: offensive aggression 83
3.3. Функциональная активность 5-HTjA рецепторов и экспрессия их гена у мышей, селекционированных на высокую предрасположенность к каталепсии 86
3.4. Экспрессия гена 5-НТ1А рецептора в структурах мозга сусликов, находящихся в разных периодах цикла сон-бодрствование 89
Глава 4. Обсуждение 94
Выводы 109
Список цитируемой литературы 111
