Введение
Глава 1. Обзор литературы 15
1.1. Особенности метаболизма аминокислот в организме при старении 15
1.1.1. Теории старения организма 15
1.1.1.2. В озрастные изменения метаболизма аминокислот... 17
1.1.2. Влияние пептидов на структурно-функциональные характеристики лимфоидной ткани 19
1.2. Молекулярные механизмы пролиферации и апоптоза клеток 27
1.2.1. Программированная клеточная гибель 27
1.2.2. Влияние цитостатиков на клеточные процессы в тканях 35
1.2.3. Функциональная роль рецепторов нейротрофических факторов в процессах клеточной пролиферации и апоптоза 38
Глава 2. Материалы и методы исследования 46
2.1. Органотипическое культивирование тканей 46
2.2. Подготовительные операции для культивирования тканей 47
2.2.1. Состав и приготовление питательной среды 47
2.2.2. Получение коллагена и коллагеновой подложки 48
2.2.3. Выделение тканей для культивирования 49
2.3 Морфологические и морфометрические методы исследования эксплантатов
2.3.1. Морфометрическая оценка индекса площади эксплантатов
2.4 Иммуногистохимические методы исследования эксплантатов 51
2.4.1. Морфометрические исследования и компьютерный анализ микроскопических изображений
2.5. Определение эффективных концентраций синтетических пептидов 54
2.6. Определение ведущего пути апоптоза, задействованного в реализации эффекта аминокислот 55
2.7. Моделирование эксперементально пренатальной гомоцистеинемии 56
2.7.1. Биохимические исследования антиоксидантных ферментов 57
2.8. Статистическая обработка результатов исследований 61
Глава 3. Результаты исследования 62
3.1. Скрининг кодируемых аминокислот в органотипической культуре лимфоидной ткани молодых и старых крыс 62
3.1.1. Влияние аминокислот на экспрессию проапоптозного белка р53 и PCNA в культуре лимфоидной ткани 63
3.2. Определение ведущих путей апоптоза, задействованных в реализации эффекта аминокислот 68
3.2.1. Исследование митохондриального пути апоптоза при действии 2,4 — динитрофенола в культуре лимфоидной ткани 68
3.2.2. Исследование рецепторно-опосредованного пути апоптоза при действии фактора роста нервов и антител к нему в культуре лимфоидной ткани 72
3.3. Влияние пептидов АВ 17 и пинеалона на интенсивности антиоксидантных ферментов 84
3.4. Изменения зоны роста эксплантантов селезенки в культуре ткани при действии циклофосфана и аминокислот . 87
3.4.1. Изменения зоны роста эксплантатов селезенки старых крыс в культуре ткани при действии циклофосфана и тимусных пептидов 94
3.4.2. Сочетанное влияние циклофосфана и пептида АВ 17 на развитие лимфоидной ткани в
органотипической культуре 94
3.4.3. Сочетанное влияние циклофосфана и АВ 17 и пептида на развитие лимфоидной ткани
в органотипической культуре селезенки старых крыс
3.4.4. Изменение зоны роста эксплантатов селезенки в 97
культуре ткани при действии циклофосфана
Глава 4. Обсуждение результатов исследования
Выводы
Практические рекомендации
Литература
