Введение
Глава 1. Обзор литературы 15
1.1. Общие свойства мезенхимных стволовых клеток 15
1.2. Предполагаемые механизмы действия мезенхимных стволовых клеток при трансплантации в миокард после ишемического повреждения 17
1.2.1. Эффекты биологически активных веществ, секретируемых мезенхимными стволовыми клетками 18
1.2.1.1. Неоваскуляризация 18
1.2.1.2. Антиапоптотический эффект 20
1.2.1.3. Противовоспалительный эффект 20
1.2.1.4. Воздействие на внеклеточный матрикс миокарда 21
1.2.1.5. Воздействие на метаболизм миокарда 22
1.2.2. Дифференцировка мезенхимных стволовых клеток в эндотелиоциты и гладкомышечные клетки сосудов 22
1.2.3. Дифференцировка мезенхимных стволовых клеток в кардиомиоциты 23
1.2.4. Воздействие на резидентные стволовые клетки сердца 24
1.3. Миграция мезенхимных стволовых клеток в зону ишемического повреждения 25
1.4. Ответ иммунной системы реципиента на трансплантацию мезенхимных стволовых клеток аллогенного и ксеногенного происхождения 26
1.5. Влияние мезенхимных стволовых клеток на морфофункциональные показатели сердца после инфаркта миокарда 27
1.6. Аритмогенез при интрамиокардиальной трансплантации мезенхимных стволовых клеток 35
1.7. Способы трансплантации мезенхимных стволовых клеток 36
1.8. Подходы к модификации мезенхимных стволовых клеток 37
1.9. Применение многоклеточных единиц трансплантации на основе мезенхимных стволовых клеток 40
1.9.1. Монослои, содержащие мезенхимные стволовые клетки 40
1.9.2. Сфероиды из мезенхимных стволовых клеток 41
1.9.3. Гидрогелевые каркасы 41
1.9.4. Капсулы, содержащие мезенхимные стволовые клетки 42
1.10. Клинические исследования, посвященные применению мезенхимных стволовых клеток для лечения ишемической болезни сердца 44
1.11. Заключение 45
Глава 2. Материалы и методы исследования 47
2.1. Выделение и культивирование мезенхимных стволовых клеток из костного мозга и жировой ткани 47
2.2. Моделирование ишемического и ишемического-реперфузионного повреждения миокарда путем окклюзии левой коронарной артерии в хроническом эксперименте у крыс 48
2.3. Модель изолированного сердца, перфузируемого по Лангендорфу 49
2.4. Методика интрамиокардиальной трансплантации мезенхимных стволовых клеток в периинфарктную область 50
2.5. Трансторакальное эхокардиографическое исследование сердца 50
2.6. Телеметрическая регистрация электрокардиограммы 51
2.7. Гистологическая оценка размера рубца и ремоделирования миокарда 51
2.8. Микроинкапсулирование мезенхимных стволовых клеток в полупроницаемые капсулы из альгината натрия 53
2.9. Иммуноферментный анализ цитокинового профиля нативных и микроинкапсулированных мезенхимных стволовых клеток 54
2.10. Определение количества клеток в микрокапсуле с помощью конфокальной микроскопии 55
2.11. In vitro оценка стабильности микрокапсул 55
2.12. Определение уровня лейкоцитов периферической крови у крыс 55
2.13. Статистическая обработка полученных результатов 56
Глава 3. Результаты исследования 57
3.1. Выделение и культивирование мезенхимных стволовых клеток из костного мозга и жировой ткани 57
3.2. Сравнение эффектов интрамиокардиальной трансплантации мезенхимных стволовых клеток костного мозга и жировой ткани на ремоделирование сердца после ишемического-реперфузионного повреждения миокарда 58
3.3. Обоснование оптимального протокола микроинкапсулирования мезенхимных стволовых клеток в полупроницаемую мембрану из альгината натрия с заданными параметрами биодеградации 66
3.4. Оценка эффекта микроинкапсулированных мезенхимных стволовых клеток на процесс постинфарктного ремоделирования сердца и изучение механизмов положительного влияния мезенхимных стволовых клеток на миокард при ишемическом повреждении 74
3.5. Оценка аритмогенной безопасности применения нативных и микроинкапсулированных мезенхимных стволовых клеток 82
Глава 4. Обсуждение результатов исследования 85
Выводы 92
Практические рекомендации .93
Список сокращений 94
Список литературы 97
