Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1 .Общие принципы сорбции белков 14
1.2 Взаимодействие белков с сорбционными материалами 17
1.3. Материалы, используемые для ионобменной хроматографии белков
1.3.1. Требования к сорбентам для хроматографии белков 22
1.3.2. Синтез полимерных сорбционных материалов 24
1.3.3. Типы высокопроницаемых сетчатых полиэлектролитов 29
1.3.4. Гетеросетчатые сорбенты 32
1.3.5. Целлосорбенты 35
1.3.6. Монолитные носители 36
1.3.7. Концентрация ионогенных групп в сорбенте 40
1.4. Синергизм и конкуренция при взаимодействии белков с полимерными сорбентами
Глава 2. Материалы и методы 47
2.2. Гетеросетчатые набухающие полиэлектролиты 47
2.2.1. Синтез сополимеров МАА, ГПМА и ЭДМА 48
2.3. Монолитные диски 49
2.3.1. Синтез макропористого сополимера ГМА-ЭГДМА 50
2.3.2. Модификация монолитных дисковых сорбентов хлоруксуснои кислотой
2.4. Методы исследования сорбентов 52
2.4.1. Определение степени набухания сорбента 52
2.4.2. Определение обменной емкости сорбента 53
2.4.3. Определение констант ионизации 53
2.4.4. Оценка пористости использованных в работе сорбентов методом ртутной порометрии
2.4.5. Метод динамической десорбции паров 55
2.5. Методы изучения сорбции белков 56
2.5.1. Определение оптимальных условий сорбции модельных белков
2.5.2. Эксперименты в статических условиях (сорбция из ограниченного объема раствора)
2.5.3.Эксперименты в динамических условиях 57
2.5.3.1.Сорбция белковых растворов на гетеросетчатых набухающих полиэлектролитах
2.5.3.2.Сорбция белковых растворов на карбоксилированных монолитных дисках
2.5.4.Определение концентрации белков 59
2.5.5. Электрофорез белков в полиакриламидном геле 60
2.5.6. Окраска белков в полиакриламидном геле 62
2.6. Гель-хроматография 63
2.7. Модификация поверхности полистирольных латексов цитохромом
2.8.Сшивание цитохрома с глутаровым альдегидом 66
2.9. Выделение белков большего размера из плазмы крови 67
2.10. Расчет биленгмюровских изотерм для пары цитохром с - БСА... 67
Глава 3. Избирательность сорбции белков на набухающих сорбентах 69
3.1. Влияние содержания ионогенных групп на структуру и свойства катионитов
3.2. Оценка взаимосвязи сорбционных свойств и структуры карбоксильных гетеростечатых катионитов с различным содержанием ионогенных групп 71
3.3. Исследование процессов сорбции модельных белков на серии набухающих гетеросетчатых катионитов с различным содержанием карбоксильных групп 76
3.3.1. Опре деление оптимума рН для сорбции модельных белков 76
3.3.2. Сорбция модельных белков из индивидуальных растворов 77
3.3.3. Последовательная сорбция модельных белков 80
3.3.4. Совместная сорбция модельных белков 85
3.3.5. Расчет биленгмюровских изотерм при «полуконкурентном» характере взаимовлияния белков в сорбционном процессе
Глава 4. Избирательность сорбции белков на модифицированных монолитных носителях 94
4.1. Модификация поверхности ГМА-ЭГДМА сополимера 94
4.2. Исследование структуры катионитов на основе ГМА-ЭГДМА сополимера методами динамической десорбции воды и ртутной порометрии 97
4.3. Адсорбция модельных белков 101
4.3.1. Определение условий адсорбции 101
4.3.2. Адсорбция модельных белков из индивидуальных растворов.. 103
4.3.3. Последовательная адсорбция модельных белков на карбоксилированных монолитных ГМА-ЭГДМА носителях
4.3.4. Совместная адсорбция модельных белков на карбоксилированных монолитных ГМА-ЭГДМА носителях
4.4. Избирательность сорбции как функция размеров сорбата 116
4.4.1. Модификация поверхности полистирольных латексов 116
4.4.2. Влияние сшивание цитохрома на избирательность сорбции 118
4.5. Сорбция белков из плазмы крови 122
Заключение 125
Выводы 126
Список литературы 127
