Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
1.1 Типы микробных сурфактантов, их физиологическая роль 10
1.2 Методы оценки продукции сурфактантов микроорганизмами, скрининг
культур-продуцентов 16
1.3 Гидрофильно-гидрофобные свойства клеток углеводородокисляющих бактерий 19
1.4 Влияние условий культивирования на продукцию биоПАВ углеводородокисляющими бактериями 23
1.5 Микробная биодеградация углеводородных загрязнений, применение СПАВибиоПАВ 30
2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 36
2.1 Бактериальные штаммы 36
2.2 Питательные среды и субстраты 36
2.3 Условия культивирования микроорганизмов, получение биомассы и куль-туральных жидкостей 37
2.4 Методы регистрации поверхностно-активных свойств 37
2.4.1 Измерение величин поверхностного натяжения 37
2.4.2 Измерение эмульгирующей активности 39
2.4.3 Измерение уровня гидрофобности поверхности клеток 40
2.5 Химическое выделение биосурфактантов 41
2.6 Оценка эффективности штаммов - продуцентов биосурфактантов в модельных экспериментах по биоремедиации 42
2.6.1 Микробиологические методы анализа 42
2.6.2 Определение концентрации нефтепродуктов, азота, фосфора 43
2.6.3 Оценка фитотоксичности нефтезагрязнённых субстратов 43
2.7 Методы математического планирования эксперимента 44
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 49
3. СКРИНИНГ КУЛЬТУР-ПРОДУЦЕНТОВ БИОСУРФАКТАНТОВ .. 49
3.1 Поверхностно-активные свойства бактерий при росте на питательном агаре 50
3.2 Поверхностно-активные свойства культур при росте в жидкой минеральной среде с углеводородами 53
3.3 Определение локализации биосурфактантов в микробных культурах ... 57
4. ГИДРОФОБНОСТЬ КЛЕТОК КАК ФАКТОР, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЙ
ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ СВОЙСТВА ЖИДКИХ БАКТЕРИ
АЛЬНЫХ КУЛЬТУР 63
4.1 Естественная гидрофобность клеток и эмульгирующая активность S, R- и М-форм культур на жидкой минеральной среде с углеводородом 63
4.2 Гидрофобность суспендированных клеток как фактор, определяющий уровень поверхностного натяжения и эмульгирующую активность жидких культур углеводородокисляющих бактерий 66
5. ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ СВОЙСТВА ХИМИЧЕСКИ
ВЫДЕЛЕННЫХ МИКРОБНЫХ СУРФАКТАНТОВ 71
5.1 Активность биосурфактантов углеводородокисляющих культур, выращенных на питательном агаре 71
5.2 Активность биосурфактантов некоторых штаммов, выращенных на жидкой минеральной среде с углеводородом 75
5.2.1 Активность клеточно-связанных биосурфактантов 75
5.2.2 Активность экстрацеллюлярных биосурфактантов 78
6. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ПОВЕРХНОСТ НО-АКТИВНЫЕ СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ-ПРОДУЦЕНТОВ БИОСУР ФАКТАНТОВ 81
6.1 Поверхностно-активные свойства культур при росте на различных типах сред 81
6.2 Зависимость поверхностно-активных и ростовых свойств жидких культур от соотношения углерода, азота и фосфора в среде 84
6.3 Поверхностно-активные свойства культур при росте на различных гидрофобных источниках углерода 90
6.4 Зависимость поверхностно-активных свойств жидких культур от продолжительности культивирования 94
6.5 Характер расслоения биомассы и поверхностно-активные
свойства жидких культур 99
7. МОДЕЛИРОВАНИЕ БИОРЕМЕДИАЦИИ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ СУБСТРАТОВ ПОСРЕДСТВОМ БАКТЕРИЙ - ПРОДУЦЕНТОВ БИОПАВ 103
7.1 Влияние культур-продуцентов клеточно-связанных биоПАВ наремедиа-цию нефтезагрязнённого чернозёма в сравнении с другими стимулирующими агентами 103
7.2 Влияние культур-продуцентов биосурфактантов на детоксикацию неф-тешлама в сравнении с активированными аборигенными штаммами 107
7.3 Биодеградация нефти на поверхности воды культурами - продуцентами
биосурфактантов 113
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 118
ВЫВОДЫ 128
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 129
