Введение
1. Обзор литературы 8
1.1. Морфогенез в культуре клеток растений 8
1.1.1. Факторы, влияющие на реализацию морфогенного потенциала in vitro 10
1.1.1.1. Влияние генотипа 10
1.1.1.2. Влияние фитогормонов на морфогенез 15
1.2. Особенности секреции у растений 19
1.3. Секреция макромолекул культурами клеток растений 23
1.3.1. Секреция белков и гликопротеинов 23
1.3.1.1. Секреция белков и морфогенный потенциал культивируемых клеток 23
1.3.1.2. Влияние экзогенных факторов и условий культивирования на секрецию белков и гликопротеинов 25
1.3.1.3. Участие секретируемых белков в регуляции дифференцировки и морфогенеза 27
1.3.2. Выделение полисахаридов культурами клеток 40
1.3.2.1. Особенности секреции полисахаридов культурами клеток растений 40
1.3.2.2. Роль внеклеточных полисахаридов в культурах клеток растений 45
1.3.2.3. Роль олигосахаринов 46
2. Материалы и методы исследования 49
2.1. Объект исследования 49
2.2. Условия культивирования 50
2.3. Приготовление цитогенетических препаратов 52
2.4. Определение митотической активности 53
2.5. Определение жизнеспособности клеток 53
2.6. Приготовление препаратов для гистологических и электронно-микроскопических исследований 53
2.7. Выделение фракции водорастворимых белков из каллусной ткани 54
2.8. Выделение полимеров из среды культивирования 54
2.9. Получение фракции поверхностных полимеров 55
2.10. Выделение арабиногалактановых белков 56
2.11. Определение содержания моносахаридов 59
2.12. Электрофорез белков в полиакриламидном геле 59
2.13. Определение активности пероксидазы 61
2.14. Влияние реагента Ярива на воспроизводство ПЭКК в морфогенном каллусе гречихи 62
2.15. Определение уровня тирозинового фосфорилирования белков 62
3. Результаты и их обсуждение 63
3.1. Динамика экстраклеточных полимеров каллусных культур гречихи татарской
с различной морфогенной активностью в ходе культурального цикла 64
3.2. Сравнение внутриклеточных и внеклеточных белков морфогенного и неморфогенного каллусов 74
3.3. Динамика полипептидного спектра поверхностных белков морфогенного каллуса в ходе пассажа 86
3.4. Влияние ингибитора секреции белков брефельдина А на процесс воспроизводства проэмбриональных клеточных комплексов в морфогенном каллусе гречихи 90
3.5. Арабиногалактановые белки, секретируемые морфогенными и неморфогенными культурами 96
3.5.1. Секретируемые арабиногалактановые белки в морфогенных и неморфогенных культурах гречихи татарской 100
3.5.2. Влияние ингибитора арабиногалактановых белков реагента Ярива на рост и морфогенез в каллусных культурах гречихи татарской 100
3.5.3. Электронно-микроскопическое изучение клеток морфогенного каллуса гречихи татарской при действии реагента Ярива 111
3.5.4. Влияние реагента Ярива на фосфорилирование белков in situ по остаткам тирозина 119
Заключение 124
Выводы 127
Список литературы 129
