СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ
ОБОЗНАЧЕНИЙ ..................................................................................................... 6
ВВЕДЕНИЕ............................................................................................................ 10
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ...................................................................... 17
1.1. Токсическое поражение печени.................................................................... 17
1.1.1. Этиопатогенез токсического поражения печени ..................................... 18
1.1.1.2. Роль окислительного стресса в развитии токсического поражения
печени..................................................................................................................... 18
1.1.1.3. Реализация апоптотических процессов при патологиях печени......... 22
1.1.1.4. Роль некроза в развитии токсического гепатита .................................. 25
1.1.1.5. Роль воспалительных процессов в развитии токсического поражения
печени..................................................................................................................... 25
1.2. Антиоксидантная система защиты организма ............................................ 30
1.2.1. Регуляция антиоксидантных ферментов на уровне транскрипции ....... 34
1.3. Современные методы фармакологической коррекции токсических
поражений печени................................................................................................. 38
1.4. Биологическая активность дигидрохинолиновых производных .............. 42
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...................................... 47
2.1. Объект исследования ..................................................................................... 47
2.2. Создание модели экспериментального токсического поражения печени 47
2.3. Подготовка материала для исследования .................................................... 48
2.4. Анализ биологической активности и токсичности соединений ............... 49
2.5. Измерение ферментативной активности ..................................................... 49
2.5.1. Определение активности аспартатаминотрансферазы............................ 50
2.5.2. Определение активности аланинаминотрансферазы .............................. 50
2.5.3. Определение активности гамма-глутамилтранспептидазы.................... 51
2.5.4. Определение активности ферментов, сопряженных с окислительновосстановительными превращениями НАД и НАДФ....................................... 51
3
2.5.4.1. Определение активности глутатионредуктазы..................................... 52
2.5.4.2. Определение активности глутатионпероксидазы................................. 52
2.5.4.3. Определение активности НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы
................................................................................................................................. 53
2.5.4.4. Определение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы............... 53
2.5.5. Определение активности каталазы............................................................ 53
2.5.6. Определение активности супероксиддисмутазы..................................... 54
2.5.7. Определение активности аконитатгидратазы.......................................... 55
2.5.8. Определение активности глутатионтрансферазы.................................... 56
2.5.9. Выделение и очистка глутатионпероксидазы.......................................... 56
2.6. Определение содержания компонентов неферментативной
антиоксидантной системы.................................................................................... 57
2.6.1. Определение содержания цитрата............................................................. 57
2.6.2. Определение концентрации восстановленного глутатиона ................... 58
2.6.3. Определение содержания α-токоферола................................................... 59
2.7. Оценка оксидативного статуса ..................................................................... 59
2.7.1. Определение содержания диеновых конъюгатов .................................... 59
2.7.2. Оценка окислительной модификации белков .......................................... 60
2.7.3. Определение интенсивности биохемилюминесценции .......................... 61
2.8. Унифицированный метод определения содержания общего белка по
биуретовой реакции .............................................................................................. 62
2.9. Определение активности миелопероксидазы.............................................. 62
2.10. Оценка активности каспаз........................................................................... 63
2.11. Оценка уровня транскриптов генов ........................................................... 63
2.12. Гистологические исследования .................................................................. 66
2.13. Иммунофлуоресцентное окрашивание ...................................................... 66
2.14. Статистическая обработка экспериментальных данных ......................... 67
ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОГО ПОТЕНЦИАЛА
ДИГИДРОХИНОЛИНОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ............................................... 68
3.1. Поиск дигидрохинолиновых производных с целевой биологической
активностью........................................................................................................... 68
4
3.2. Воздействие дигидрохинолиновых производных на маркерные
показатели развития токсического поражения печени у крыс......................... 69
3.3. Анализ морфологических изменений в печени крыс при развитии
токсического поражения печени и воздействии дигидрохинолиновых
производных .......................................................................................................... 72
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ДИГИДРОХИНОЛИНОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ НА
ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В
ТКАНЯХ КРЫС ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ................ 75
4.1. Влияние дигидрохинолиновых производных на интенсивность
биохемилюминесценции в печени и сыворотке крови крыс с токсическим
поражением печени............................................................................................... 75
4.2. Окислительная модификация белков в печени и сыворотке крови крыс
при введении 1-бензоил-6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина и 6-
гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина на фоне индукции
тетрахлорметанового повреждения печени........................................................ 77
4.3. Содержание диеновых конъюгатов в печени и сыворотке крови крыс при
введении 1-бензоил-6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина и 6-
гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина на фоне индукции
тетрахлорметанового повреждения печени........................................................ 81
4.4. Воздействие 1-бензоил-6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина
и 6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина на активность
аконитатгидратазы и содержание цитрата в печени и сыворотке крови крыс
при индукции тетрахлорметанового повреждения печени............................... 83
ГЛАВА 5. ИНТЕНСИВНОСТЬ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ У
КРЫС ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ И
ВВЕДЕНИИ 6-ГИДРОКСИ-2,2,4-ТРИМЕТИЛ-1,2-ДИГИДРОХИНОЛИНА И
1-БЕНЗОИЛ-6-ГИДРОКСИ-2,2,4-ТРИМЕТИЛ-1,2-ДИГИДРОХИНОЛИНА90
ГЛАВА 6. ВОЗДЕЙСТВИЕ 6-ГИДРОКСИ-2,2,4-ТРИМЕТИЛ-1,2-
ДИГИДРОХИНОЛИНА И 1-БЕНЗОИЛ-6-ГИДРОКСИ-2,2,4-ТРИМЕТИЛ1,2-ДИГИДРОХИНОЛИНА НА ИНТЕНСИВНОСТЬ АПОПТОТИЧЕСКИХ
ПРОЦЕССОВ ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ У
КРЫС...................................................................................................................... 97
ГЛАВА 7. ВОЗДЕЙСТВИЕ ДИГИДРОХИНОЛИНОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ
НА ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ У КРЫС
С ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВЫМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ.......................... 101
5
7.1. Исследование функционирования супероксиддисмутазы и каталазы у
крыс с тетрахлорметановым поражением печени, получавших 6-гидрокси2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин и 1-бензоил-6-гидрокси-2,2,4-триметил1,2-дигидрохинолин............................................................................................ 102
7.2. Функционирование глутатионовой антиоксидантной системы и
содержание α-токоферола у крыс с тетрахлорметановым поражением печени,
получавших 6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин и 1-бензоил-6-
гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин................................................ 109
7.3. Очистка и исследование некоторых каталитических свойств
глутатионпероксидазы из печени крыс с тетрахлорметановым поражением
печени, получавших дигидрохинолиновое производное................................ 118
7.4. Воздействие 6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина и 1-
бензоил-6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина на активность
НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы и глюкозо-6-
фосфатдегидрогеназы при тетрахлорметановом поражении печени у крыс 124
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ................................................................................................... 128
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ИСТОЧНИКОВ............................................... 138
ПРИЛОЖЕНИЕ 1 ................................................................................................ 164
ПРИЛОЖЕНИЕ 2 ................................................................................................ 165
