Введение
Глава I. Регуляция системы свертывания крови антикоагулянтами прямого действия 24
1.1. Влияние гликозаминогликанов на активность серпинов 26
1.2. Связь между структурой сульфатированных полисахаридов и антикоагулянтной активностью 36
1.3. Использование концентрата антитромбина для лечения тромботических состояний 79
1.4. Прямые ингибиторы тромбина 81
Глава II. Материалы и методы .87
Собственные исследования
Глава III. Исследование антикоагулянтной активности сульфатов хитозана 107
3.1. Влияние нефракционированных сульфатов хитозана с молекулярной массой (ММ) 20-123 кДа и количеством серы 8,8-16,9% на свертывающую систему крови in vitro и ex vivo 107
3.2. Связь между молекулярной массой, степенью сульфатирования, введением карбоксиметильных групп и антикоагулянтной активностью сульфатов хитозана 122
3.3. Комплексы сульфатов хитозана с ММ 9-56 кДа с поликатинами 150
3.4. Нейтрализация хитозанами с ММ 16 к Да и 21 кДа ингибирования антикоагулянтами амидолитическои активности тромбина и фактора Ха 156
ГЛАВА IV. Влияние гепаринов с молекулярной массой 1,6-9,0 кДа на свертывание крови in vitro и in vivo 160
4.1. Антикоагулянтная активность НМГ, полученных гидролизом нефракционированного гепарина (НФГ) протеолитическим ферментным комплексом препарата Протеаза С 161
4.2. Фармакодинамические параметры низкомолекулярного гепарина с ММ 5,4 кДа (НМГ- 5,4), полученного с помощью гидролиза НФГ-4 ферментным комплексом Протеаза С 163
4.3. Антикоагулянтная активность низкомолекулярных гепаринов полученных деполимеризацией нефракционированных гепаринов хитинолитическим ферментным комплексом Streptomycess kurssanovii иммобилизованным на силохроме 167
4.4. Сравнение эффективности определений активности НМГ против активированного фактора X с помощью наборов "РеаХром-гепарин" (НПО "Ренам") и Berichrom heparin (Dade Behring) 173
4.5. Фармакодинамические параметры НМГ с ММ 4,7 кДа (НМГ- 4,7), полученного с помощью гидролиза НФГ (Московский эндокринный завод) ферментным комплексом Streptomycess kurssanovii 177
4.6. Влияние низкомолекулярных гепаринов, полученных с помощью гидролиза НФГ ферментными комплексами Streptomycess kurssanovii (НМГ-4,7) и Протеаза С (НМГ-5,4) на развитие экспериментального тромбоза у крыс и геморрагическую активность
4.7. Антикоагулянтная активность образцов НМГ, полученных деполимеризацией НФГ гидролазами
4.8. Влияние НМГ, полученных деполимеризацией НФГ лизоцимом на свертывание крови in vitro и in vivo
4.9. Влияние НМГ с ММ 7,0 кДа [НМГ-7,0; получен гидролизом НФГ-4) лизоцимом] на свертывание плазмы кроликов при подкожном введении
4.10. Электрофорез комплексов НМГ - поликатион 193
4.11. Нейтрализация антикоагулянтной активности образцов НМГ 196
ГЛАВА V. Влияние натуральных и химически модифицированных сульфатированных полисахаридов из морских водорослей на свертывание крови in vitro и in vivo 199
5.1. Антикоагулянтная активность сульфата альгината и наноструктур на его основе 199
5.2. Связь между молекулярной массой фукоиданов из водорослей Fucus evanescens, Laminaria cichorioides и ингибированием активности тромбина/фактора Ха 201
5.3. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на агрегацию тромбоцитов человека in vitro 206
5.4. Нейтрализация антитромбиновой активности фукоиданов in vitro 207
5.5. Влияние на величину антикоагулянтной активности плазмы при внутривенном введении фукоиданов из водорослей Fucus evanescens и Laminaria cichorioides экспериментальным животным 208
5.6 Влияние внутривенного введения фукоидана из водоросли Fucus evanescens на активность в плазме кроликов ротеина С и плазминогена 212
5.7. Противотромботическая и геморрагическая активности фукоидана из водоросли Fucus evanescens 213
5.8. Влияние моносахаридного состава фукоиданов из бурых морских водорослей на антикоагулянтную активность и подвижность комплексов с сульфатом протамина 216
5.9. Ингибирование активности тромбина и фактора Хагидролизованными и выделенными хроматографически фракциями фукоиданов из водоросли Laminaria saccharina 221
ГЛАВА VI. Антикоагулянтная активность сульфатированных полисахаридов из травянистых и древовидных растений 227
6.1. Ингибирование низкомолекулярными фракциями сульфатированного галактоманнана из семян Cyamopsis Tetragonoloba активности тромбина и активированного фактора Ха 227
6.2. Сравнение антикоагулянтной активности галактоманнов из растений семейства бобовых 231
6.3. Влияние внутривенного введения сульфатированного галактоманнана на антикоагулянтную и антитромботическую активность плазмы крыс 233
6.4. Антикогулянтная активность химически модифицированных галактоманнанов 236
6.5. Ингибирование наноструктурами на основе галактоманнанов активности тромбина и фактора Ха 238
6.6. Антикоагулянтная активность in vitro сульфатированного арабиногалактана из древесины лиственницы 242
ГЛАВА VII. Влияние производных целлюлозы, крахмала, пектина и цианидинов на свертывание плазмы крови человека in vitro 244
7.1. Антикоагулянтная активность химически модифицированных образцов целлюлозы 244
7.2. Антикоагулянтная активность сульфатированной целлюлозы выделенной из древесины осины и соломы пшеницы 255
7.3. Влияние степени сульфатирования на антикоагулянтную активность крахмала 260
7.4. Антикоагулянтная активность сульфатов. пектина из травянистых растений 264
7.5. Антикоагулянтная активность цианидинов коры березы, ели, сосны, лиственницы, кедра 267
ГЛАВА VIII. Ингибирование активности тромбина и фактора Ха синтетическими гомофукозными олигосахаридами и производными пептидов 271
8.1. Связь между структурой и антикоагулянтной активностью синтетических гомофукозных олигосахаридов 271
8.2. Антикоагулянтная активность оригинальных синтетических производных пептидов 277
ГЛАВА IX. Антитромботическая активность экспериментального концентрата антитромбина человека и пара-аминобензойной кислоты 285
9.1. Антитромботическая активность смеси из раствора концентрата антитромбина человека и нефракционированного гепарина (Bauer) 285
9.2. Антитромботическая активность смеси лиофильно высушенного концентрата антитромбина человека и нефракционированного гепарина (Bauer или ОАО "Белмедпрепарат") 287
9.3. Антитромботическая активность пара-аминобензойной кислоты 293
Заключение 302
Выводы 346
Рекомендации для внедрения в практику и науку 349
Список литературы 350
Приложение 438
