Введение
Понятие феномена прекондиционирования 5
Типы прекондиционирования 5
Гипоксическое прекондиционирование 5
Ишемическое прекондиционирование 7
Дистантное прекондиционирование 8
«Перекрестная устойчивость» (cross-tolerance) 9
Фазы развития прекондиционирования 10
Механизмы прекондиционирования 11
Увеличение локального мозгового кровотока 11
Уменьшение эксайтотоксичности глутамата 12
Роль системы оксида азота в реализации защитных эффектов прекондиционирования 13
Участие белков теплового шока 14
Влияние прекондиционирования на апоптоз 15
Транскрипционные факторы, активирующиеся в процессе прекондиционирования 16
Регуляторний фактор, индуцируемый гипоксией — HIF-1 16
Транскритщонный фактор NF-KB 17
Другие транскрипционные факторы 18
АТФ-зависимые К+-каналы и их роль в реализации защитного эффекта прекондиционирования 19
Физиологическая роль АТФ-зависимых К+-каналов 19
Строение АТФ-зависимых К+-каналов 20г
Регуляция АТФ-зависимых К+-каналов 21
Роль АТФ-зависимых К+-каналов при метаболическом стрессе 22
АТФ-зависимые К*-каналы плазматической мембраны клеток 22
АТФ-зависимые К+-каналы внутренней мембраны митохондрий 23
Механизмы реализации защитного эффекта АТФ-зависимых К+-каналов 25
Связь с протеинкиназой С (РКС) 25
Взаимодействие с системой оксида азота (NO) 27
Взаимодействие с системой апоптоза 29
CLASS Экспериментальная часть 3 CLASS 2
Материалы и методы исследования 32
Моделирование локального ишемического инсульта 32
Методы оценки размера очага поражения коры головного мозга крыс 33
Гистохимический метод оценки размера очага поражения 33
Оценка размера зоны инфаркта методом магниторезонансной томографии (МРТ) 34
Сравнение методов оценки размера области поражения левого полушария: гистохимическй метод окраски ТТХиМРТ 36
Морфологический метод оценки нейроглиального показателя в перифокальной зоне очага поражения 37
Измерение концентрации нейроспецифического кальций-связывающего белка S100P в сыворотке крови крыс 38
Измерение концентрации глюкозы в крови экспериментальных животных... 39
Метод регистрации и расчета гемодинамических параметров работы сердечно сосудистой системы крыс 39
Оценка поведенческой активности крыс 40
Тест «Приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) 40
Тест «Открытое поле» (ОП) 41
Тест «Y-образный лабиринт» 42
Тест «Условныйрефлекс пассивного избегания» (УРПИ) 43
Статистическая обработка данных 43
Протоколы эксперимента по изучению сравнительной эффективности различных типов прекондиционирования у крыс с моделью ишемического инсульта и роли К+лтФ-каналов в феномене прекондиционирования 44
Общая схема исследования 44
Используемые в исследовании модели прекондиционирования 45
Режим нормобарического гипоксического прекондиционирования (НГП) 45
Моделирование ишемического прекондиционирования (ИП) 45
Моделирование дистантного прекондиционирования (ДП) 45
Серия I: изучение влияния острой и отсроченной фаз различных типов прекондиционирования на размер очага поражения коры левого полушарияАб Серия II: исследование влияния отсроченной фазы (24 ч) НГП или ИП на
последствия моделируемого ишемического инсульта 47.
Протокол эксперимента по изучению влияния глибенкламида на параметры работы сердечно-сосудистой системы 49
Протокол эксперимента по изучению роли АТФ-зависимых К+-каналов в процессе прекондиционирования 50-
Протокол эксперимента по изучению влияния прекондиционирования и блокады АТФ-зависимых К+-каналов на выработку УРПИ 51
Результаты исследования 53
Влияние острой и отсроченной фаз различных типов прекондиционирования на размер инфаркта коры левого полушария 53
Изменение размера очага поражения под действием прекондиционирования, проведенного за 1 час до ОЄМА 53
Изменение размера очага поражения под действием прекондиционирования, проведенного за 24 часа до ОСМА 53
Изменение размера очага поражения под действием прекондиционирования, проведенного за 72 часа до ОСМА 54
Динамика изменения концентрации белка S100P в сыворотке крови крыс после фокального ишемического инсульта 55
Исследование роли АТФ-зависимых К+-каналов в реализации защитного эффекта гипоксического и ишемического типов прекондиционирования 57
Влияние глибенкламида на концентрацию глюкозы в сыворотке крови и гемодинамические параметры работы сердечно-сосудистой системы крыс 57
Динамика изменения концентрации глюкозы в крови экспериментальных животных 60
Результаты, полученные в эксперименте с использованием нормобарического гипоксического прекондиционирования 61
Оценка размера области поражения коры левого полушария мозга 61
Оценка нейроглиального показателя в перифокальной области очага поражения левого полушария мозга 62
CLASS Результаты, полученные в эксперименте с использованием ишемического прекондиционировани CLASS я 65
Оценка размера области поражения коры левого полушария мозга 65
Оценка нейроглиального показателя в перифокальной области очага поражения левого полушария мозга 66
Результаты тестов для оценки поведения, проведенных в разные сроки после моделирования фокального инсульта 71
Оценка неврологического статуса и поведенческих реакций крыс на поздних сроках (26-32 сутки) после моделирования инсульта 71
Оценка неврологического статуса и поведенческих реакций крыс на 7-8 сутки после моделирования инсульта 73
Результат, полученный в эксперименте с использованием нормобарического гипоксического прекондиционирования 73
Результат, полученный в эксперименте с использованием ишемического прекондиционирования 75
Выработка условного рефлекса пассивного избегания на 3 сутки после моделирования инсульта 77
Результат, полученный в эксперименте с использованием нормобарического гипоксического прекондиционирования 77
Результат, полученный в эксперименте с использованием ишемического прекондиционирования 79
Обсуждение результатов 80
Заключение 94
Выводы 96
Список литературы 98
Список сокращений 114
