Введение
Список сокращений введение
Обзор литературы
Этапы ангиогенеза и его регуляция
Методы изучения ангиогенеза
Сердечно-сосудистые заболевания и этиологическая роль факторов окружающей среды
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки как 23
перспективный инструмент в ангиогенной терапии
Материалы и методы исследований 33
Реактивы, материалы и оборудование 33
Химические реагенты и материалы 33
Антитела 34
Оборудование 35
Среды для культивирования клеток 35
Экспериментальные животные 36
Выделение и культивирование клеток 36
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки из жировой 36
ткани человека
Эндотелиальные клетки из пупочной вены человека 37
Криоконсервация мультипотентных мезенхимальных стромальных 38
клеток и эндотелиальных клеток
Структура исследования 39
Методы исследования 41
Иммуноцитохимическое окрашивание клеток 41
Микроскопия и морфометрия 42
Определение жизнеспособности клеток 42
Построение кривых клеточного роста
Оценка способности клеток к остеогенной и адипогенной дифференцировке в индуктивных средах роста
Определение содержания растворимых медиаторов в среде культивирования
Оценка ангиогенной активности клеток на модели формирования сосудистой сети в хориоаллантоисной оболочке яйц японского перепела
Характеристика мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток и эндотелиальных клеток
Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1 Динамика развития сосудистой сети в хориоаллантоисной оболочке яиц перепела (Coturnix coturnix japonica)
3.2 . Влияние компонентов среды, факторов роста и гипоксии (5%О2) на формирование сосудов в хориоаллантоисной оболочке
3.3. Влияние условий культивирования (концентрация ростовых факторов фетальной телячьей сыворотки, фазы клеточного роста, длительность субкультивирования) на ангиогенную активность мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, при стандартной лабораторной концентрации кислорода (20% О2)
3.4. Ангиогенный потенциал мезенхимальных стромальных клеток, постоянно культивируемых при концентрации О2, близкой к уровню в тканях организма концентрации кислорода (5% О2)
3.5 Влияние остеоиндукции на ангиогенную активность мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток при 20% и 5% О2
3.6. Изучение активности растворимых ангиогенных медиаторов в 79
кондиционированной среде после взаимодействия мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток с другими клеточными типами (митоген-стимулированные лимфоциты и эндотелиальные клетки) при 20% и 5% О2
Заключение 86
Выводы 89
Список литературы
