Введение
Глава 1. Обзор литературы. Внеклеточные гликолипиды дрожжевых грибов 9
1.1. Распространение и структура внеклеточных гликолипидов 9
1 2.Условия образования внеклеточных гликолипидов, пути биосинтеза и их 16
генетическая детерминация
1.3. Методы очистки внеклеточных гликолипидов 19
1.4. Биологическая активность и перспективы практического использования 22 внеклеточных гликолипидов дрожжевых грибов
Глава 2, Материалы и методы исследования 30
2.1. Объекты исследования 30
2.2.Состав среды и условия культивирования 31
2.3.Очистка гликолипидов 32
2.4.Тонкослойная хроматография 33
2.5.Метанолиз гликолипидов 34
2.6.Углеводный анализ 34
2.7.Масс-спектрометрический анализ 34
2.8.ЯМР-спектроскопия 35
2.9.Определение антифунгальной активности по подавлению роста тест-культур 35
на агаризрованной среде
2ДО.Определение выживаемости клеток дрожжей после обработки гликолипидами
2.11.Определение выхода АТФ из клеток дрожжей 37
2.12. Окрашивание бромкрезоловым пурпурным 37
2. ІЗ.Измерение закислення среды клетками Sacchawmyces cerevisim 38
2.14.Получениесферопластов из клеток Saccharomyces cerevisiae 38
2.15.Определение влияния целлобиозолипида В на накопление ортофосфата и полифосфатов у Sacchammyces cerevisiae.
2,16. Определение ортофосфата 39
2.17.0пределение содержания поляфосфатов 40
2.18.Определение активности снглюкозидазы 40
Глав» 3. Результаты исследования и их обсуждение 42
3.1. Получение антифунгальных гликолипидов из культуральной жидкости дрожжевых грибов
3.2.Физико-химические свойства и структура целлобиозолипидов 46
3.2. .Растворимость в воде и органических растворителях 46
3,2.2.Стабильность при хранении 46
3,2.3.Структура целлобиозолипидов 48
З.З. Антифунгальная активность целлобиозолипидов. 59
З.ЗЛ. Влияние целлобиозолипидов на рост и выживаемость дрожжей и грибов 59
3.3.2.Мембраноповреждающее действие целлобиозолипидов 69
3.3,2.1.Выход АТФ из клеток дрожжей при обработке целлобиозолипидами 69
3.3.2.2,Дополнительные методы оценки мембраноповреждающего действия целлобиозолипидов
3.3.2.3.Действие целлобиозолипида В на сферопласты и синтез полифосфатов у Sacchammyces cerevisiae
Заключение 82
Выводы 89
Список цитируемой литературы 90
Обзор литературы. Внеклеточные гликолипиды дрожжевых грибов
