Введение
Глава 1. Обзор литературы 10
1.1. Митохондрии и окислительный стресс 10
1.1.1. Физиология и метаболизм митохондрий 10
1.1.2. Активные формы кислорода 11
1.2. Патологии и окислительный стресс 16
1.2.1. Диабет 20
1.2.2. Онкологические заболевания 31
Глава 2. Экспериментальная часть 30
2.1. Объекты и методы исследования 40
2.1.1. Объект исследования 40
2.1.2. Методы исследования
2.1.2.1 Администрирование аллоксана и SkQ1 .40
2.1.2.2 Взятие образцов тканей 41
2.1.2.3 Экстракция тотальной РНК 41
2.1.2.4 Проведение аналитического электрофореза нуклеиновых кислот в
агарозном геле .43
2.1.2.5 Проведение реакции обратной транскрипции .44
2.1.2.6 Проведение qPCR 44
2.1.2.7 Микрочиповый анализ генной экспрессии 46
2.1.2.8 Изоляция митохондрий
2.1.2.9 Измерение скорости дыхания и продукции перекиси водорода митохондриями 48
2.1.2.10 Измерение концентрации белка 49
2.1.2.11 Статистическая обработка данных 49
2.2. Результаты и их обсуждение .50
2.2.1. Окислительный стресс при диабете 1 типа .50
2.2.1.1 Дифференциальная экспрессия генов поджелудочной железы 50
2.2.1.2. Экспрессия генов белков-компонентов системы защиты от АФК в клетках поджелудочной железы крыс .63
2.2.1.3 Изучение влияния SkQ1 на экспрессию генов окислительного метаболизма 72
2.2.1.4 Эксперименты на изолированных митохондриях 77
2.2.2. Изучение светлоклеточного ПКР 85
2.2.2.1 Снижение уровня генной экспрессии окислительных метаболических путей при светлоклеточном раке почки 85
Заключение 99
Выводы .106
Список использованных источников
