Введение
1. Обзор литературы 9
1.1 Роль Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) в инфекционной патологии птиц 9
1.2 Распространенность возбудителя орнитобактериоза 11
1.3 Орнитобактериоз 13
1.3.1. Способы распространения. Клинические признаки и патологоанатомические изменения 13
1.3.2, Краткая характеристика биологических свойств ORT 15
1.4 Экспериментальное воспроизведение инфекции 22
1.5 Диагностика орнитобактериоза птиц 25
1.5.1 Бактериологическая диагностика орнитобактериоза 25
1.5.2 Серологическая диагностика орнитобактериоза 27
1.5.3 Диагностика орнитобактериоза с использованием иммуноферментного анализа 31
1.5.4 Молекулярно-генетические методы в диагностике орнитобактериоза 33
Заключение 49
2. Собственные исследования 51
2.1 Материалы и методы 51
2.1.1 Референтные культуры ORT 51
2.1.2 Изучение популяции О. rhinotracheale с применением методов сканирующей электронной микроскопии 51
2.1.3 Пробы патологического материала 52
2.1.4 Пробы сыворотки крови 53
2.1.5 Объект биологическихисследований 53
2.1.6 Питательные среды 53
2.1.7 Биохимические тесты 55
2.1.8 Тест на образование каталазы 55
2.1.9 Тест на образование оксидазы 56
2.1.10 Создание видоспецифичных праймеров 56
2.1.11 Выделение ДНК 56
2.1.12 Постановка ПЦР-амплификации 60
2.1.13 Электрофоретический анализ продуктов ПЦР 63
2.1.14 Постановка ИФА 63
2.2 Результаты собственных исследований 65
2.2.1 Оценка морфологических, культуральных и биохимических свойств ORT 65
2.2.2 Изучение популяции ORT при сканирующей электронной микроскопии 70
2.2.3 Результаты бактериологических исследований 74
2.2.4 Экспериментальное воспроизведение инфекции 76
2.2.5 Изучение распространенности орнитобактерий 78
2.2.6 Разработка метода обнаружения возбудителя орнитобактериоза на основе ПЦР 81
2.2.7 Сравнительный анализ методов выделения ДНК из патологического материала от птиц 82
2.2.8 Оптимизация процесса амплификации 83
2.2.9 Апробация чувствительности и специфичности сконструированной ПЦР тест - системы 85
2.2.10 Определение возможности использования метода ПЦР для
обнаружения О. rhinotracheale в патологическом материале от
птиц 87
3. Обсуждение результатов исследования 89
Выводы 97
Практические предложения 99
Список литературы
