Введение
2. Обзор литературы 12
2.1. Распространение ЗУД КРС и ущерб, причиняемый этим заболеванием 12
2.2. Эпизоотологическая характеристика ЗУД КРС 15
2.3.Характеристика семейства Poxviridae 19
2.3.1. Классификация поксвирусов 19
2.3.2. Строение поксвирусов 21
2.3.3. Геном поксвирусов 23
2.3.4. Репродукция поксвирусов 25
2.4. Общая характеристика ЗУД КРС 27
2.4.1. Определение заболевания 27
2.4.2. Патогенез и клиническая картина при ЗУД КРС 29
2.4.3. Патологоанатомические изменения при ЗУД КРС 31
2.5. Культивирование вируса ЗУД КРС 32
2.6.Характеристика иммунобиологических свойств вируса ЗУД КРС 33
2.6.1. Морфология и химический состав вируса ЗУД КРС 33
2.6.2.Устойчивость вируса ЗУД 33
2.6.3.Антигенная структура 34
2.6.4.Антигенная активность вируса ЗУД КРС 34
2.6.5.Антигенная вариабельность и родство 34
2.7 Меры борьбы и профилактика ЗУД КРС 34
2.8.Диагностика ЗУД КРС 38
2.9. Заключение по обзору литературы 41
3. Собственные исследования 44
3.1 Материалы 44
3.1.1 Вирус 44
3.2.1 Животные 44
3.2.1 Животные 44
3.1.3 Культура клеток 44
3.1.4 Оборудование и инструменты 44
3.1.5 Растворы и питательные среды 45
3.2 Методы 46
3.2.1Выделение вируса ЗУД КРС в культуре клеток 46
3.2.2 Культивирование вируса ЗУД КРС, получение и титрование вируссодержащего материала 46
3.2.3 Заражение животных 47
3.2.4 Отбор проб крови и патологического материала от животных для лабораторного исследования 47
3.2.5Определение уровня вируснейтрализующих антител к вирусу ЗУД в сыворотках крови животных 48
3.2.6 Выделение ДНК и постановка ПЦР-РВ 48
3.2.7 Секвенирование 49
3.3 Статистическая обработка результатов исследования 49
4. Результаты собственных исследований 50
4.1 Анализ распространения ЗУД КРС в Российской Федерации за 2015-2018 г. 50
4.2 Получение штамма вируса ЗУД КРС «ВНД КРС/Дагестан/2015» 55
4.2.1 Выделение изолята вируса ЗУД КРС из проб патологического материала в культурах клеток 55
4.2.2 Контроль стерильности и отсутствия контаминации посторонними вирусами 57
4.2.3 Контроль биологической активности и стабильности штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» 58
4.2.4 Идентификация и филогенетическое родство штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» (методом ПЦР) 59
4.2.5.Депонирование штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» 60
4.3-Оптимизация условий культивирования штамма «ВНДКРС/ДАГЕСТАН/2015» вируса ЗУД 60
4.3.1 Изучение чувствительности различных перевиваемых линий культур клеток к вирусу ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» 61
4.3.2 Влияние возраста культур клеток на репродукцию вируса 65
4.3.3 Накопление вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/ДАГЕСТАН/2015»в культурах клеток ЯДК-04 и ТЯ при разной множественности заражения 66
4.3.4 Влияние времени культивирования на инфекционную активность вируса ЗУД КРС 68
4.3.5 Влияние величины рН среды на репродукцию вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» в перевиваемых клеточных культурах ЯДК-04 и ТЯ 68
4.3.6 Влияние приема ««замораживания – оттаивания» на выход вируса 70
4.3.7 Устойчивость вируса ЗУД при различных температурах хранения 70
4.4 Изучение клинических признаков вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» на естественно восприимчивых животных 73
4.5. Оптимизация условий постановки реакции микронейтрализации при выявлении антител против ЗУД КРС 80
5. Заключение 86
6. Выводы 92
7. Практическое предложение 93
8. Список литературы 94
9. Приложения 107
