Введение
Глава 1 Блокаторы медленных кальциевых каналов в регуляции образования соединительной ткани (обзор литературы) 23
1.1. Механизмы межклеточных взаимодействий на территории соединительной ткани 23
1.1.1. Фибробласты – основные функционально активные клетки соединительной ткани – как возможный объект фармакологического воздействия 24
1.1.2. Макрофагально-фибропластическое взаимодействие 27
1.1.3. Основы фиброгенеза. Воспаление как стереотипная реакция 29
1.1.4. Физиологические основы кальциевого гомеостаза: каналы и насосы мембран фибробластов, внутриклеточные кальций-связывающие белки 33
1.2. Блокаторы медленных кальциевых каналов (антагонисты кальция) как возможный инструмент воздействия на функцию фибробластов 38
1.2.1. Фармакологические свойства блокаторов медленных кальциевых каналов (антагонистов кальция). Возможности использования для регуляции функции фибробластов 38
1.2.2. Классификация органических антагонистов кальция 39
1.2.3. Фармакологические эффекты блокаторов медленных кальциевых каналов 41
1.2.4. Влияние блокаторов медленных кальциевых каналов на экспрессию транскрипционного фактора NF-kB в культуре активированных фибробластов 42
1.3. Актуальные области клинического использования модулирующей активности антагонистов кальция на функции фибробластов 44
1.3.1. Клиническое обоснование целесообразности фармакологической регуляции образования соединительнотканных перитонеальных спаек 45
1.3.1.1. Современные представления о методах профилактики образования и рецидива послеоперационных перитонеальных спаек 48
1.3.1.2. Клинико-патогенетические особенности гипертрофических и келоидных рубцов 52
1.3.1.3. Клиническое использование антифиброгенного действия БМКК 62
Резюме 63
Глава 2 Материалы и методы исследования 65
1.1. Общая характеристика экспериментального и фармацевтического материала 67
1.2. Экспериментальное обоснование доз БМКК при спайкообразовании in vivo и in vitro 75
1.2.1. Подбор дозового режима интроперитонеального введения верапамила крысам 75
1.3. Методы исследования 76
1.3.1. Культуральные методы 76
1.3.2. Морфологические и иммуноцитохимические методы 79
1.3.3. Биохимические методы 81
1.3.4. Иммунологические методы 82
1.3.5. Электрофизиологические методы 82
1.4. Фармацевтические исследования 83
1.4.1. Разработка верапамилсодержащего крема 83
1.4.2. Фармакотехнологические методы 84
1.4.2.1. Метод получения модели биологической мембраны 84
1.4.2.2. Метод диализа через полупроницаемую мембрану 84
1.4.2.3. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии 85
1.4.3. Способ приготовления антирубцового крема 86
1.5. Характеристика материала при моделировании патологических рубцов кожи 86
1.5.1. Характеристика рубцовых повреждений кожи 87
1.5.2. Биомикроскопия кожи 88
1.6. Методы статистического анализа полученных результатов 88
Глава 3 Моделирование спаечного процесса брюшной полости и критерии оценки его выраженности 91
3.1. Степень выраженности спаечного процесса, макро- и микроскопическая характеристика спаек при гемоперитонеуме у крыс и кроликов 91
3.2. Функциональная активность перитонеальных фибробластов и макрофагов при развитии спаечного процесса в брюшной полости 96
3.2.1. Биохимическая характеристика процесса перитонеального спайкообразования 96
3.2.2. Содержание провоспалительных цитокинов в перитональной жидкости крыс на этапах пролиферации и завершения воспалительного процесса при гемоперитонеуме 99
Резюме 101
Глава 4 Оценка дозозависимого эффекта регуляции активности перитонеальных фибробластов и макрофагов блокаторами медленных кальциевых каналов при использовании клеточных технологий 103
4.1. Морфо-функциональная характеристика перитонеальных фибробластов и макрофагов в культуре клеток 103
4.2. Сравнительная оценка классических блокаторов медленных кальциевых каналов верапамила , дилтиазема и нифедипина в качестве регуляторов функции перитонеальных фибробластов и макрофагов; дозозависимый эффект 108
4.3. Оценка влияния классических БМКК верапамила, дилтиазема и нифедипина на активность ядерного фактора транскрипции NF-kB 115
Резюме 122
Глава 5 Верапамил как средство профилактики перитонельного спайкообразования в эксперименте 124
5.1. Подбор дозового режима интраперитонеального введения верапамила 124
5.2. Влияние верапамила на формирование спаек в брюшной полости крыс и кроликов при гемоперитонеуме 130
5.3. Воздействие верапамила на синтез фибробластами компонентов межклеточного матрикса при моделировании спаечного процесса в брюшной полости 133
5.4. Коррекция цитокинсинтетической активности макрофагов крыс при гемоперитонеуме с использованием верапамила 137
Резюме 140
Глава 6 Фармакотехнологические исследования по разработке оптимального состава антирубцового крема с верапамилом 141
6.1. Обоснование выбора действующего вещества антирубцового крема – верапамила 142
6.2. Выбор оптимальной основы для антирубцового крема 142
6.3. Биофармацевтическое изучение процесса высвобождения верапамила из различных количественных композиций антирубцового крема 144
Резюме 148
Глава 7 Верапамил как средство ремоделирования патологического кожного рубца в эксперименте 149
7.1. Характеристика патологических кожных рубцов и их изменений при экспериментальной терапии 149
7.2. Данные биомикроскопии рубцовых изменений кожи 152
7.3. Сравнительная морфологическая характеристика патологических рубцов у крыс после экспериментальной терапии верапамилом в составе антирубцового крема и водно-вазелин-ланолиновой основой крема 153
7.3.1. Структура кожи спины контрольных крыс 153
7.4. Формирование рубцов после иссечения кожного лоскута 160
7.5. Изучение эффективности действия верапамила на процесс окончательной трансформации патологического рубца 170
Резюме 179
Глава 8 Обсуждение результатов исследования 181
Заключение 195
Выводы. 199
Список сокращений 202
Указатель литературы 203
