Введение
1. Обзор литературы 8
1.1. Лакказы: распространение и роль в окружающей среде 8
1.1.1. Ферментативная активность почв 8
1.1.2. Общая характеристика лакказ как представителей оксидоредуктаз 14
1.1.3. Физиологические функции лакказ 23
1.1.4. Участие лакказы в процессах трансформации ксенобиотиков гуминовыми кислотами 28
1.2. Гуминовые кислоты и их функции в биосфере 29
1.2.1. Общая характеристика состава и структуры гуминовых кислот 32
1.2.2. Взаимодействие гуминовых кислот с ферментами 38
1.2.3. Участие гуминовых кислот в деградации ксенобиотиков 41
1.3. Атразин: применение и поведение в окружающей среде 42
1.3.1. Общая характеристика и применение атразина 42
1.3.2. Поведение атразина в окружающей среде 45
2. Материалы и методы 54
2.1. Выделение и характеристика лакказы Coriolus hirsutus 54
2.1.1. Жидкофазное культивирование Coriolus hirsutus 54
2.1.2. Выделение и очистка лакказы Coriolus hirsutus 55
2.1.3. Определение активности лакказы 56
2.2. Выделение, физико-химическая и биологическая характеристика препарата гуминовых кислот 58
2.2.1. Выделение гуминовых кислот угля 58
2.2.2. Элементный анализ 58
2.2.3. Эксклюзионная хроматография 58
2.2.4. ЯМР спектроскопия 59
2.2.5. Оценка биологической активности (биотест) 59
2.3. Отбор и характеристика почвенных образцов 60
2.3.1. Отбор почвенных образцов 60
2.3.2. Определение кислотности 61
2.3.3. Определение содержания органического углерода 61
2.3.4. Определение содержания обменных катионов 62
2.3.5. Определение гранулометрического состава 62
2.4. Определение атразина и его основных метаболитов 63
2.5. Исследование влияния лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми кислотами в гомогенной среде 65
2.5.1. Взаимодействие лакказы с атразином 65
2.5.2. Взаимодействие лакказы с гуминовыми кислотами 65
2.5.3. Влияние лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми кислотами 66
2.6. Изучение влияния лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми
кислотами в гетерогенной среде 67
2.6.1. Изучение кинетики адсорбции атразина почвами 68
2.6.2. Влияние лакказы на взаимодействие атразина с почвами 68
2.7 Проведение лабораторно-вегетационных экспериментов 70
2.7.1. Проведение лабораторно-вегетационных экспериментов на перлите 70
2.7.2. Проведение лабораторно-вегетационных экспериментов на почве 72
3. Результаты и их обсуждение 74
3.1. Выделение и характеристика лакказы 74
3.2. Выделение, физико-химическая и биологическая характеристика препарата гуминовых кислот 78
3.2.1. Характеристика физико-химических свойств гуминовых кислот 78
3.2.2. Характеристика биологических свойств гуминовых кислот 83
3.3. Отбор и характеристика почвенных образцов 85
3.4. Исследование влияния лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми кислотами в гомогенной среде 88
3.4.1. Взаимодействие лакказы с гуминовыми кислотами 88
3.4.2. Взаимодействие лакказы Coriolus hirsutus с атразином 97
3.4.3. Влияние лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми кислотами 97
3.5. Исследование влияния лакказы на взаимодействие атразина с гуминовыми кислотами в гетерогенной среде 100
3.6. Оценка возможности использования лакказы Coriolus hirsutus в биотехнологиях очистки почв, загрязненных атразином 109
3.6.1. Исследование влияния лакказы на детоксификацию атразина гуминовыми кислотами на перлите 109
3.6.2. Исследование влияния лакказы на детоксификацию атразина гуминовыми кислотами в почвенной среде 113
Выводы 118
Список цитируемой литературы 119
Выражение признательности 139
