Введение................................................................................................................. 5
Актуальность и степень разработанности темы исследования .................... 5
Цель и задачи исследования ............................................................................. 7
Научная новизна ................................................................................................ 8
Теоретическая и практическая значимость работы ....................................... 9
Степень достоверности и апробация работы................................................ 10
Положения, выносимые на защиту:............................................................... 10
Личный вклад автора....................................................................................... 11
Публикации ...................................................................................................... 11
Структура и объём диссертации .................................................................... 11
Глава 1. Обзор литературы................................................................................. 13
1.1. Распространенность и характеристика острых гнойно-воспалительных
заболеваний челюстно-лицевой области................................................................. 13
1.2. Этиология и патогенез ............................................................................. 14
1.3. Патогенетические принципы лечения острых гнойно-воспалительных
заболеваний челюстно-лицевой области................................................................. 18
1.3.1. Антибиотикотерапия ......................................................................... 20
1.3.2. Фаготерапия........................................................................................ 21
1.3.3. Рекомбинантные биопрепараты ....................................................... 22
1.3.4. Генная терапия ................................................................................... 26
1.3.5. Клеточная терапия ............................................................................. 30
1.4. Моделирование острых гнойно-воспалительных заболеваний
челюстно-лицевой области в эксперименте............................................................ 33
Глава 2. Материалы и методы............................................................................ 35
2.1. Моделирование флегмоны челюстно-лицевой локализации............... 353
2.2. Получение препаратов, содержащих рекомбинантный генетический
материал...................................................................................................................... 38
2.3. Получение генетически модифицированных мононуклеарных клеток
крови пуповины человека ......................................................................................... 39
2.3.1. Выделение мононуклеарных клеток из крови пуповины человека
.................................................................................................................................. 39
2.3.2. Трансдукция мононуклеарных клеток крови пуповины человека
аденовирусными векторами .................................................................................. 40
2.3.3. Оценка эффективности трансдукции мононуклеарных клеток крови
пуповины человека аденовирусными векторами................................................ 40
2.4. Экспериментальные группы животных ................................................. 41
2.4.1. Антибактериальная терапия флегмоны........................................... 43
2.4.2. Прямая генная терапия флегмоны с помощью аденовирусного
вектора, содержащего кДНК гена лактоферрина................................................ 43
2.4.3. Клеточно-опосредованная генная терапия флегмоны с помощью
генетически модифицированных МККП, несущих кДНК гена лактоферрина44
2.5. Объективное обследование экспериментальных животных................ 44
2.6. Лабораторные исследования ................................................................... 45
2.6.1. Общий анализ крови экспериментальных животных .................... 45
2.6.2. Микробиологический анализ перитонеального экссудата ............ 45
2.7. Гистологическое исследование шейных лимфатических узлов
экспериментальных животных................................................................................. 46
2.7.1. Морфометрический анализ............................................................... 46
2.7.2. Иммунофлуоресцентный анализ...................................................... 46
2.8. Статистический анализ............................................................................ 47
Глава 3. Результаты исследования .................................................................... 484
3.1. Микробиологический анализ перитонеального гнойного экссудата.. 48
3.2. Молекулярный анализ эффективности трансдукции МККП in vitro.. 49
3.3. Эффективность генного и генно-клеточного препаратов при лечении
флегмоны у крысы..................................................................................................... 51
3.3.1. Объективное обследование ............................................................... 51
3.3.2. Оценка общего анализа крови .......................................................... 53
3.3.3. Морфологическая характеристика состояния шейных
лимфатических узлов............................................................................................. 54
3.4. Исследование генетически модифицированных МККП in vivo .......... 60
3.5. Анализ экспрессии репортерного гена gfp в клетках шейного
лимфатического узла ................................................................................................. 61
Глава 4. Обсуждение результатов ..................................................................... 63
Перспективы дальнейшей разработки темы................................................. 70
Заключение .......................................................................................................... 71
Выводы................................................................................................................. 73
Список сокращений ............................................................................................ 75
Список литературы ............................................................................................. 77
Список иллюстративного материала .............................................................. 107
