ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………… 6
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………........ 20
1. Особенности выращивания картофеля (S.tuberosum L.) в условиях
Западно – Сибирского региона……………….…………….………..
20
1.1. Селекционная работа по культуре картофеля (S.tuberosum L.)
в Омской области…………………………………………………….
24
1.2. Сомаклональная изменчивость у растений картофеля при
культивировании in vitro и возможности ее применения в
селекции……………………………………………………………….
28
1.3. Вирус картофеля PVS как фактор стресса у растений
картофеля……………………………………………………………...
30
1.4. Ответная реакция растений картофеля в нормальных и
стрессовых условиях произрастания……………………………...…
35
1.5. Молекулы активных форм кислорода и антиоксидантные
ферменты растений …………………………………………………..
39
1.6. Характеристика фермента супероксиддисмутазы (SOD),
ассоциированного с выработкой активных форм кислорода……...
44
1.7. Характеристика фермента каталазы (CAT), ассоциированного с
выработкой активных форм кислорода…………………………..….
47
1.8. Характеристика ферментов пероксидазы (POX),
ассоциированных с выработкой активных форм кислорода……..
48
1.9. Основные места генерации активных форм кислорода (ROS) в
растительных клетках………………………………………………..
52
1.10. Регуляция активности антиоксидантных ферментов у
растений……………………………………………………………….
54
Глава II. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ……………….. 61
2.1. Объекты исследований……………………………………………… 61
2.2. Получение каллусной ткани картофеля в условиях in vitro ……... 65
2.3. Регенерация растений in vitro ……………………………..…………… 67
2.4. Регенерация растения из апикальной меристемы………………… 67
2.5. Выращивание растений – регенерантов в почвенных условиях…. 68
2.6. Инокуляция растений картофеля (S. tuberosum L) PVS вирусом... 70
2.7. Диагностика растений картофеля на наличие мозаичных вирусов
методом иммуноферментного анализа (ИФА) и
иммунохроматорафических экспресс–тестов (ИХА)…………….. 71
2.8. Гомогенезация образцов растительного материала картофеля…... 72
2.9. Определение активности антиоксидантных ферментов
картофеля……………………………………………………………..
72
5
2.10. Определение активности антиоксидантных ферментов у
растений картофеля in gel…………………………………………………
74
2.11. Статистический анализ……………………………………………… 76
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ………………………… 77
3.1. Обоснование выбора объектов исследований отечественных
перспективных сортов картофеля г.Омск и Омской области…… 77
3.2. Получение каллусной ткани картофеля из листовых и стеблевых
эксплантов в условиях in vitro ……………………………………. 78
3.3. Регенерация растений из каллусных культур и получение
сомаклонов in vitro…………………………………………………. 83
3.4. Сомаклональные варианты картофеля, полученные из каллуса ... 86
3.5. Инокуляция растений вирусной инфекцией …………………… 91
3.6. Определение активности антиоксидантных ферментов
картофеля……………………………………….................................. 93
3.7. Определение активности пероксидазы у микроклонов
картофеля………………………………….…………………………. 94
3.8. Определение активности каталазы у микроклонов картофеля … 97
3.9. Определение активности супероксиддисмутазы у микроклонов
картофеля ……………………………………………………………. 100
3.10. Определение активности пероксидазы in gel……………………... 100
3.11. Определение активности каталазы in gel…………………………. 103
3.12. Определение активности супероксиддисмутазы in gel………….. 105
ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………. 107
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ИСТОЧНИКОВ……………………….. 109
ПРИЛОЖЕНИЯ……………………………………………………………. 145
