Введение
Глава 1. Биологическое значение ассоциативных взаимоотношений микроорганизмов (Обзор литературы) 14
1. 1. Характеристика микробных ассоциаций 14
1.2. Особенности морфологических и физиологических свойств Blastocystis hominis 22
1.3. Эколого-эпидемиологическая характеристика инвазии B.hominis 36
Глава 2. Материалы и методы исследований 44
2. 1. Характеристика культур, используемых в работе 44
2. 2. Среды культивирования 47
2. 3. Лабораторные животные 47
2. 4. Методика изучения микробиоценоза кишечника 48
2. 5. Методы выявления B.hominis 48
2. 6. Исследование нуклеотидных последовательностей генов, определяющих продукцию факторов патогенности 49
2. 7. Определение биологических свойств микроорганизмов 52
2. 8. Методика культивирования микросимбионтов в ассоциации 55
2.9. Определение вирулентности ассоциативных симбионтов 56
2. 10. Определение структурных компонентов клеточной оболочки ассоциантов-бластоцист 57
2.11. Постановка кератоконъюнктивальной пробы 58
2. 12. Методы статистического анализа 59
Глава 3. Характеристика биологических свойств микросимбионтов в протозойно-бактериальных ассоциациях толстой кишки человека 61
3.1. Изучение взаимосвязи между особенностями строения клеточной поверхности и вирулентностью штаммов В. hominis 61
3.2. Оценка характера изменений микробиоценоза кишечника при бластоцистной инвазии 70
3.3. Характеристика показателя вирулентности Е.соїі в рамках ассоциативного симбиоза с бластоцистами в условиях кишечного биотопа 76
Глава 4. Анализ динамики численности ассоциативных микросимбионтов В.hominis и Е.соїі в процессе взаимоадаптации при совместном культивировании 79
4. 1. Изменение численности эшерихий и высоковирулентных штаммов бластоцист 19
4. 2. Изменение численности эшерихий и умеренновирулентных штаммов бластоцист 93
4. 3. Изменение численности эшерихий и авирулентных штаммов бластоцист 106
4.4. Результаты изучения взаимодействия бактерий Е.соїі с цистами B.hominis 113 Ї
Глава 5. Изучение встречаемости нуклеотидных последовательностей генов патогенности, обеспечивающих поддержание численности популяции Е.соїі в ассоциации с B.hominis in vitro 116
5.1. Определение нуклеотидных последовательностей генов контролирующих синтез фимбрий S, Р и 1 типа 117
5.2. Обнаружение нуклеотидных последовательностей еаеА гена в различных фенотипических группах Е.соїі до и после сокультивирования с бластоцистами 124
5.3. Изучение генетических детерминант токсинообразования в различных фенотипических группах is. coli до и после сокультивирования с бластоцистами 126
5. 4. Сравнительный анализ частоты встречаемости нуклеотидных последовательностей генов патогенности E.coli при ассоциативных симбиотических взаимоотношениях с B.hominis до и после сокультивирования 137
Глава 6. Исследование факторов патогенности Escherichia coli и Blastocystis hominis в алгоритме ассоциативного симбиотического взаимодействия до и после сокультивирования 153
6.1. Анализ биологических свойств E.coli и высоковирулентных бластоцист до и после совместного культивирования 153
6.2. Анализ биологических свойств E.coli и умеренновирулентных бластоцист до и после совместного 169 культивирования
6.3. Анализ биологических свойств E.coli и авирулентных бластоцист до и после совместного культивирования 183
Глава 7. Оценка патогенности микросимбионтов E.coli, полученных после совместного культивирования с ассоциантами B.hominis in vivo 189
7.1. Сравнительный анализ уровня экспрессии факторов патогенности и количества генов патогенности в геноме Е. coli 194
Заключение 199
Выводы 223
Список литературы
