Введение
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1. Обзор литературы 9
1.1. Регенерация растений из соматических тканей Prunus 9
1.1.1 .Клональное микроразмножение косточковых культур in vitro 9
1.1.1.1. Введение в культуру 9
1.1.1.2. Субкультивирование побегов 11
1.1.1.3. Укоренение побегов 14
1.1.1.4. Перевод растений в нестерильные условия 17
1.1.2. Индукция морфогенеза из изолированных тканей 19
1.1.3. Подбор оптимальных условий регенерации 23
1.1.4. Генетическая стабильность растений, полученных методами
культуры тканей 30
1.2. Агробактериальная трансформация Prunus 34
1.2.1. Agrobacterium - естественные векторы переноса генетической
информации в растения 34
1.2.2. Механизм вирулентности агробактерий 36
1.2.3. Конструирование обезоруженных векторов, промоторы, селективные и репортерные гены 39
1.2.4. Генетическая трансформация Prunus с использованием векторной системы Agrobacterium 42
1.2.5. Регенерация трансгенных растений 48
1.2.5.1. Выбор экспланта 48
1.2.5.2. Действие трансформационного/селекционного стресса наэксплант
1.2.6. Перспективы генетической инженерии в селекции сливы 53
ГЛАВА 2. Цели и задачи исследований 59
ГЛАВА 3. Объекты и методы исследований 60
3.1. Объекты исследований 60
3.2. Культивирование сливы in vitro 65
3.3. Регенерация сливы из листовых и стеблевых эксплантов 68
3.4. Определение чувствительности к антибиотикам листовых тканей 70
3.5. Бактериальные штаммы и плазмиды 71
3.6. Трансформация листовых эксплантов и селекция каллусных клонов 72
3.7. Определение ОШ-активности в трансгенных клетках 74
3.8. Статистическая обработка результатов исследований. 75
ГЛАВА 4. Результаты исследований 76
4.1. Культивирование сливы Т УИГО 76
4.1.1. Введение в культуру 76
4.1.2. Субкультивирование побегов 78
4.1.3. Укоренение микрочеренков и перевод растений в нестерильные условия 83
4.2. Регенерация сливы домашней из стеблевых и листовых эксплантов.. 94
4.2.1. Некоторые особенности морфогенеза в культуре листовых
дисков косточковых 94
4.2.2. Влияние минерального составасреды на эффективность
регенерации из листовых эксплантов сливы домашей 99
4.2.3. Влияние регуляторов роста растений на индукцию
морфогенеза в культуре листовых тканей сливы домашней .... 102
4.2.4. Влияние вида и концентрации углевода в среде на частоту
регенерации побегов из листовых эксплантов сливы домашней.. 109
4.2.5. Оценка регенерационного потенциала сортов сливы домашней. 112
4.2.6. Изменение морфогенетического потенциала в зависимости от
типа и происхождения экспланта 116
4.2.7. Влияние ориентации эксплантов на среде на каллусообразование
и органогенез в культуре высечек листьев сливы домашней... 121
4.2.8. Сравнение морфогенетического потенциала высечек листьев,
полученных in vivo и in vitro 123
4.3. Чувствительность к антибиотикам листовых тканей сливы 127
4.4.
