Введение
Глава 1. Обзор литературы 9
1.1. Регуляторные белки, биологически активные в сверхмалых дозах 9
1.2. Анатомическое и клеточное строение молочной и предстательной желез 16
Молочная железа 16
Структура ВКМ молочной железы 18
Предстательная железа 23
Структура ВКМ предстательной железы в норме и при патологии 26
1.3. Состав и свойства секретов молочной и предстательной желез 26
Молоко 26 Молоко как коллоидная система 38 Транспорт компонентов молока в клетках молочной железы 46 Состав секрета предстательной железы 52
Глава 2. Экспериментальная часть 57
2.1. Используемые реактивы и оборудование 57
2.2. Получение тканевых экстрактов 58
2.3. Высаливание тканевых экстрактов сернокислым аммонием 58
2.4. Получение фракций супернатантов молока, а также препаратов сухого молока и детского питания 59
2.5. Изоэлектрофокусирование фракций супернатантов 59
2.6. Высокоэффективная жидкостная хроматография 59
2.7. Исследование препаратов регуляторных белков с помощью метода кругового дихроизма 60
2.8. Электрофорез белков в полиакриламидном геле 60
2.9. Определение концентрации белка во фракциях регуляторных белков 61
2.10. Определение влияния исследуемых гликопротеинов на вязкоупругие свойства мембран гепатоцитов мыши при кратковременном органном культивировании in vitro 62
2.11. Получение поликлональной кроличьей антисыворотки 63
2.12. Иммуноферментный анализ антител (ELISA) 63
2.13. Роллерное органное культивирование предстательной железы мыши in vitro 64
2.14. Гистологическое исследование органных культур простат мышей после воздействия регуляторных белков, выделенных из предстательных желез быков 64
2.15. Исследование локализации регуляторных белков в тканях иммуногистохимическим методом 65
2.16. Атомно-силовая микроскопия (АСМ) исследуемых РБ 65
2.17. Определение гидродинамического радиуса частиц РБ в водном растворе 66
2.18. Исследование РБ с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР) 67
Глава 3. Результаты и их обсуждение 68
3.1. Регуляторные белки молока, молочной и предстательной желез крупного рогатого скота: выделение и очистка 68
3.2. Локализация слабокислого РБ молока и слабокислого РБ предстательной железы в тканях молочной и предстательной желез, соответственно 80
3.3. Исследование влияния в СМД кислого и слабокислого регуляторных белков, выделенных из предстательных желез КРС, на состояние предстательных желез мышей в условиях роллерного культивирования in vitro 82
3.4. Исследование РБ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии 87
3.5. Исследование гидродинамического радиуса частиц РБ в водных растворах 92
3.6. Исследование состояния РБ с помощью атомной силовой микроскопии 97
3.7. Исследование РБ с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) 100
3.8. Исследование вторичной структуры пептидных фракций слабокислого РБ
предстательной железы и слабокислого РБ молока с помощью кругового дихроизма 101
3.9. Исследование РБ с помощью ядерного магнитного резонанса 103
Заключение 112
Выводы 113
Список литературы
