Введение
Глава 1. Выделение, изучение физико-химических и каталитических свойств, иммобилизация и применение для аналитических целей глюкозооксидазы, алкогольоксидазы и холестериноксидазы .
1А. Обзор литературы
1А.1. Введение 13
1 А.2 Источники получения и основные свойства алкогольоксидазы, глюкозооксидазы и холестериноксидазы
1А.2.1. Алкогольоксидаза 15
1А.2.2. Глюкозооксидаза 18
1А.2.3. Холестериноксидаза 19
1А.2.4. Механизм действия глюкозооксидазы, 26
алкогольоксидазы и холестериноксидазы
1А.З. Использование ферментов класса оксидаз в аналитических целя 1 А.ЗЛ. Химические и физико-химические методы определения глюкозы, спиртов, холестерина. /Краткая историческая справка/ 29
1А.3.2. Методы анализа глюкозы, спиртов и холестерина с использованием растворимых GMC-оксидоредуктаз 39
1 А.3.3. Методы анализа глюкозы, спиртов и холестерина с
использованием иммобилизованных GMC-оксидоредуктаз 51
1 А.3.4. Ферментные электроды, реакторы и другие аналитические
устройства на основе иммобилизованных GMC-оксидоредуктаз 53
1А.4. Изучение возможности создания ферментного электрода для определения субстратов НАД-зависимых дегндрогеназ
1А.4.1. Методы определения субстратов НАД-зависимых дегидрогеназ 57
1А.4.2. Получение полимерных форм НАД+ 63
1 А.4.3. Полимерные субстраты оксидоредуктаз 65
1А.5. Заключение 67
1В. Материалы и методы исследований 69
1с. Результаты и их обсуждение
1С.1 Изучение реакции окисления глюкозы под действием глюкозооксидазы 1С
1.1. Изучение кинетических параметров реакции, катализируемой глюкозооксидазой, в присутствии кислорода 77
1С. 1.2. Изучение реакций, катализируемых глюкозооксидазой, в присутствии искусственных акцепторов электронов 80
1С.2. Изучение реакции окисления холестрина под действием холестриноксидазы
1С.2.1. Введение 87
1С.2.2. Зависимость реакции окисления холестерина холестринокси- дазой от «предыстории» растворов субстрата 90
1С.2.3. Механизм, объясняющий кинетические особенности реакции, катализируемой холестриноксидазой 92
1С.2.4. Выделение и характеритика комплекса холестрин - А4-холес-тен-3-он 101
1С.2.5. Влияние структурной организации ассоциатов холестерина на реацию его окисления холетериноксидазой 103
1С.2.6. Холестериноксидаза - индикатор структурной организации ассоциатов холестерина 111
1С.З. Алкогольоксидаза: поиск штамма-продуцента, наращивание, выделение и характеристика препаратов фермента 124
1C.4. Разработка аналитических методов, приборов и устройств для определения субстратов оксидоредуктаз 1С.4.1. Введение 129
1 С.4.2. Критерии подбора носителей для иммобилизации ферментов. Теория и практика 131
1С.4.3. Анализаторы на основе иммобилизованных ферментов для определения субстратов оксидаз 138
1С.4.4. Способ повышения надежности и точности анализа в области нижнего предела определяемых концентраций 142
1С.4.5. Универсальный ферментный электрод для определения субстратов НАД-зависимых дегидрогеназ 145
1С.4.6. Универсальное индикаторное устройство для определения концентраций субстратов ферментативных реакций - тест-капсулы 155
1С.4.7. Спектрофотометрические методы определения глюкозы на основе реакции глюкозооксидазы с искусственными акцепторами электронов 15 9
1С.5. Заключение 161
Раздел 2. Углеводный обмен: механизмы патологических процессов
Глава 2. Механизм развития диабетических
Осложнений
2а. Обзор литературы
2А.1. Введение 168
2А.2. Гликозилирование белков 169
2А.З. Гликозилированные белки в оценке степени компенсации нарушения углеводного обмена 174
2А.4. Роль гликозилированных белков в патогенезе диабетических осложнений 176
2А.5. Роль промежуточных продутов процесса гликозилирования в патогенезе диабетических осложнений 184
2А.6. Диабетические осложнения как следствие интенсификации полиолового пути метаболизма глюкозы 190
2А.7. Анализ различных гипотез развития диабетических осложнений 193
2В. Материалы и методы исследований 198
2c. Результаты 200
2d. Обсуждение результатов в рамках
Новой концепции генерализованного механизма развития диабетических осложнений
2D.1. Обоснование роли ингибиторов сериновых протеиназ в развитии диабетических осложнений 204
2D.2. Поиск «гуанидинового яда» и оценка потенциальной патологической роли метилглиоксаля в развитии диабетических осложнений 210
2D.3. Статус нейтрофилов при сахарном диабете 212
2D.4. Сценарий разрушения организма при сахарном диабете 218
2D.5. Заключение 228
Глава 3. Диабет и рак. механизмы взаимовлияния (Гипотеза)
ЗАЛ. Введение: Метилглиоксаль - «разрушитель» или «защитник»? 231
ЗА.2. Гипергликемия <-» Метилглиоксаль Рак 234
ЗА.З. Сахарный диабет и рак 242
ЗА.4. Протеинкиназа С - регулятор процессов опухолевого роста и диабетических осложнений 254
ЗА.5. Протеинкиназа С и процессы злокачественной пролиферации 256
ЗА.6. Заключение 262
Основные результаты и выводы 264
Список цитированной литературы
