ВВЕДЕНИЕ ................................................................................................................. 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ........................................................................ 16
1. Современное состояние онкологической помощи в Российской Федерации
16
2. Общая характеристика наночастиц как потенциальных противоопухолевых
агентов ..................................................................................................................... 18
2.1. Способы получения наночастиц золота .................................................... 19
2.2. Пути стабилизации растворов наночастиц золота .................................... 22
2.3. Модификация поверхности наночастиц золота ........................................ 23
3. Наночастицы золота как потенциальные противоопухолевые агенты ............ 26
3.1. Фармакокинетика наночастиц золота .......................................................... 26
3.2. Специфические физико-химические свойствах наночастиц золота,
используемые в химиотерапии ............................................................................ 29
3.3. Собственная противоопухолевая активность наночастиц золота и их
использование в качестве средств доставки химиопрепаратов......................... 31
3.4. Способы оценки противоопухолевой активности веществ in vitro ............ 34
4. Возможные механизмы реализации противоопухолевой активности
наночастиц золота ................................................................................................... 38
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ................................................................ 44
2.1. Объект исследования ....................................................................................... 44
2.2. Клеточные линии и условия их культивирования .......................................... 46
2.3. Оценка цитотоксичности гликонаночастиц золота ........................................ 47
2.4. Оценка механизмов противоопухолевой активности гликонаночастиц
золота ....................................................................................................................... 49
2.4.1. Приготовление клеточных лизатов для оценки механизмов
противоопухолевой активности гликонаночастиц золота ................................. 51
2.4.2. Оценка влияния гликонаночастиц золота на интенсивность
окислительного стресса ....................................................................................... 53
2.4.3. Оценка влияния гликонаночастиц золота на величину
трансмембранного потенциала митохондрий .................................................... 53
2.4.4. Оценка способности гликонаночастиц золота инициировать
апоптотический процесс ...................................................................................... 54
2.4.5. Оценка влияния гликонаночастиц золота на функционирование ABCB1-белка ..................................................................................................................... 55
2.4.5.1. Оценка влияния гликонаночастиц золота на относительное количество ABCB1-белка ................................................................................. 55
2.4.5.2. Оценка влияния гликонаночастиц золота на функциональную активность ABCB1-белка ................................................................................. 56
2.4.5.2.1. Разработка и валидация методики количественного определения фексофенадина в лизате клеток Caco-2 методом ВЭЖХ-МС/МС .............. 56
2.4.5.2.2. Оценка функциональной активности ABCB1-белка .................... 60
2.5. Статистическая обработка полученных результатов ................................... 61
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ .................................................... 62
3.1. Определение цитотоксичности гликонаночастиц золота .............................. 62
3.2. Механизмы противоопухолевой активности гликонаночастиц золота ........ 66
3.2.1. Влияние гликонаночастиц золота на интенсивность окислительного стресса .................................................................................................................. 67
3.2.2. Оценка способности гликонаночастиц золота инициировать апоптотический процесс ...................................................................................... 69
3.2.3. Влияние гликонаночастиц золота на функционирование ABCB1-белка 72
3.2.3.1. Влияние гликонаночастиц золота на относительное количество ABCB1-белка ..................................................................................................... 72
3.2.3.2. Разработка и валидация методики количественного определения фексофенадина в лизате клеток Caco-2 методом ВЭЖХ-МС/МС ................. 73
3.2.3.3. Оценка функциональной активности ABCB1-белка .......................... 83
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ .................... 86
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ...................................................................................................... 101
ВЫВОДЫ ................................................................................................................ 102
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .............................................................. 104
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ................................................................................... 105
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .................................................................................... 110
