Введение
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Современные представления о строении и механизме действия Са2+-АТФазы СР 10
2. Исследование Са2+-АТФазы СР методом люминесценции. 12
3. Исследование-структуры Са -АТФазы методом спиновых зондов 23
ГЛАВА II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
1. Основные реактивы 29
2. Выделение СР 30
3. Получение Са2+-АТФазы 31
4. Определение АТФазной активности 31
5. Исследование кинетики затухания фосфоресценции эритрозина и эозина 32
6. Определение степени гидрофобности нитроксильных радикалов 33
7. Исследование собственной фосфоресценции СР 34-
8. Измерение флуоресценции триптофановых остатков СР и Са2+-АТФазы 34
9. Регистрация спектров поглощения исследуемых препаратов 35
10. Исследование действия биологически-активных соединений на мембрану СР и Са2+-АТФазу методом ЭПР 35
11. Метод химической модификации триптофановых остатков с помощью N -бромсукцинимида 36
12. Определение тиоловых групп СР и Са2+-АТФазы методом Эллмана-Бенеша 36
ГЛАВА III. ИЗУЧЕНИЕ СТРОЕНИЯ КАТАЛИТИЧЕСКИ-АКТИВНОГО
ЦЕНТРА Са2+-АТФазы МЕТОДОМ ТРИПЛЕТНЫХ ЗОНДОВ
1. О методе фосфоресценции 37
2. О методе триплетних зондов 38
3. Определение локализации каталитически-активного центра Са2+-АТФазы относительно мембраны СР 39
4. Определение взаимного расположения мест связывания АТФ, MCL , Са2+ в каталитически-активном центре Са2*-АТФазы СР 46
ГЛАВА ІV. ИССЛЕДОВАНИЕ ЛОКАЛИЗАЦИИ ТРИПТОФАНОВЫХ ОСТАТКОВ В МЕМБРАНЕ СР И Са2+-АТФазе
1. Определение вклада отдельных триптофановых остатков Са -АТФазы в собственную флуоресценцию СР .55
2. Исследование локализации триптофановых остатков в районе активного центра Са-АТФазы СР 62
3. Исследование взаимного расположения триптофановых остатков Са2+-АТФазы и мест связывания ионов Са2+ методом флуоресценции 66
4. Участие триптофановых остатков Са-АТФазы СР в механизме активного транспорта Са^т 71
5. Определение взаимного расположения триптофановых остатков и мест связывания ионов Са2+ и McL в
Са2+-АТФазе СР 73
6. Исследование взаимодействия АТФ с Са2+-АТФазой СР по изменению параметров фосфоресценции триптофановых остатков фермента .80
ГЛАВА V ИССЛЕДОВАНИЕ ФИЗИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ МЕХАНИЗМА
ДЕЙСТВИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ-АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА МЕМБРАНУ СР И Са2+-АТФазу
1. Исследование механизма действия неорганических соединений платины и палладия на везикулы СР 87
2. Изучение механизма взаимодействия комплексов платина-альбумин и палладий-альбумин с Са -АТФа-зой СР 93
3. Исследование механизма действия 5-сульфо-8-меркап-тохинолиновых производных платины и палладия на препараты Са2+-АТФазы СР 102
4. Изучение механизма действия на мембраны СР психотропных соединений 107
5. Исследование влияния соединений Ве2+ на мембраны
СР 109
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 114
ВЫВОДЫ 118
ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА 121
