Введение
Глава 1. Обзор литературы 10
1.1. Тритерпеновые кислоты природного происхождения 10
1.2. Цитотоксические свойства тритерпеновых кислот 13
1.3. Механизмы цитотоксичности урсоловой и помоловой кислот 20
1.4. Апоптоз как основной механизм антинеопластического действия 21
1.5. Аутофагия .29
1.6. Параптоз .37
1.7. Заключение 42
Глава 2. Материалы и методы 43
2.1. Материалы 43
2.2. Характеристика растительного сырья Chamaenerion angustifolium и выделение помоловой кислоты 43
2.3. Введение флюоресцентной метки в молекулы тритерпеновых кислот урсанового ряда 45
2.4. Методы оценки генотоксических и мутагенных свойств. Бактериальные тест-системы 46
2.5. Методы оценки потенциальных противоопухолевых свойств. МТТ-тест, микроскопическое исследование клеточных культур 48
2.6. Детекция апоптоза .49
2.7. Методы статистической обработки 50
2.8. Молекулярный докинг .50
Глава 3. Результаты и обсуждение 51
3.1. Изучение химического состава липофильного экстракта Chamaenerion angustifolium и выделение помоловой кислоты 51
3.1.1. Исследование динамики накопления экстрактивных веществ 51
3.1.2. Разработка методики очистки тритерпеновых кислот 53
3.2. Изучение биологической активности помоловой кислоты 55
3.2.1. Мутагенные и генотоксические свойства 55
3.2.2. Антимутагенные свойства 58
3.2.3. Цитотоксические свойства .61
3.2.4. Исследование изменения клеточной морфологии 65
3.2.5. Проапоптотические свойства .67
3.3. Модельный эксперимент по получению флюоресцентно меченых тритерпеновых кислот и возможный механизм их действия 70
3.3.1. Предполагаемый механизм цитотоксического действия тритерпеновых кислот урсанового ряда 70
3.3.2. Синтез и характеристика флюоресцентно меченой урсоловой кислоты .75
3.3.3. Сравнение цитотоксичности нативной и меченой урсоловой кислоты .81
3.3.4. Сравнение проапоптотических свойств нативной и меченой урсоловой кислоты .82
3.3.5. Исследование динамики проникновения и внутриклеточного распределения меченой урсановой кислоты .83
Заключение .88
Выводы 90
Благодарность .91
Список литературы
