Введение
Глава 1. Обзор литературы 9
1.1.Физико-химическая характеристика липополисахаридов грамотрицательных бактерий 9
1.1.1. О-специфическая цепь (О-антиген) 10
1.1.2. Состав и структура кора 10
1.1.3. ЛипидА 11
1.1.4. Конформация мономеров эндотоксинов 14
1.1.5. Роль температуры, катионов и рН среды в В а фазовом переходе липида А 16
1.2. Химический состав и заряд мембраны эритроцитов 19
1.2.1. Молекулярная организация мембраны эритроцитов человека 20
1.2.2. Заряд поверхности эритроцитов 24
1.3. Роль белков, фосфолипидов мембраны и заряда поверхности клетки при взаимодействии с ЛПС 25
1.3.1. Специфическое взаимодействие ЛПС с мембраной эритроцитов 25
1.3.2, Липиды как рецепторы эндотоксинов 26
1.4. Влияние встраивания ЛПС на физико-химические свойства мембраны эритроцитов человека 29
1.4.1. Эластичность мембраны клеток при встраивании липида А 29
1.4.2. Влияние эндотоксинов на текучесть мембраны 30
1.4.3. Эффекты ЛПС на морфологию мембраны эритроцитов 31
1.4.4. Модификация заряда клеточной мембраны эндотоксинами 33
Глава 2. Материалы и методы. Объекты и методы исследования 35
2.1. Определение хемотипа бактерий методом агглютинации клеток клеток по Линдбергу 35
2.2. Получение ЛПС из Rb. capsulaius 35
2.3. Определение чистоты препарата ЛПС 36
2.4. Определение содержания КДО в препаратах ЛПС по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (Karkhanis et al., 1978; Osbomet al. 1979) 36
2.5. Определение качественного состава ЛПС методом электрофореза по Крауссе (Krauss et al, 1988) 37
2.6. Определение содержания катионов металлов в ЛПС 38
2.7. Получение флуоресцентных форм эндотоксинов 38
2.8. Встраивание ЛПС в мембраны теней эритроцитов и нативных клеток 39
2.9. Исследование содержания ЯПСж,.свр!!. и ЛПС.С0/,-.в мембранах теней эритроцитов с помощью карбоцианового красителя 39
2.10. Определение электрофоретической подвижности эритроцитов (ЭФП) 40
2.11. Модификация мембраны эритроцитов ферментами 41
2.12. Исследование способности полимиксина В взаимодействовать с ЛПСдй. встроенным в мембрану эритроцитов 41
Глава 3. Результаты и их обсуждение 42
3.1. Сравнительная характеристика ЛПС из Rhodobacter capsulatus PG и из Escherichia coli 42
3.2. Исследование способности Ш1Сяь.еврх. и ЛПСя./,- к насыщению мембран эритроцитов человека 47
3.3. Влияние ЛПС на электроповерхностные характеристики эритроцитов 49
3.3.1. Исследование влияния ЛПС/а,.^. и ЛПСя.т^ на заряд клеточной поверхности 49
3.3.2. Исследование роли гидрофильного фрагмента ЛПС в изменении ЭФП эритроцитов при встраивании эндотоксинов 53
3.4. Влияние поверхностных белков и заряда мембраны эритроцитов на взаимодействие с эндотоксинами 57
3.5. Исследование способности полимиксина взаимодействовать с ЛПСщ.сч,,,., встроенными в мембрану эритроцитов 63
Выводы 66
Список литературы 69
