Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы и
1.1. Множественность форм протеасом, их структурная организация и физиологическая роль
1.1.1. 20S-npoTeacoMbi 12
1.1.2. 268-протеасомы 15
1.1.3. Смешанные или «гибридные» протеасомы 20
1.1.4. Иммунные протеасомы и их роль в иммунном ответе 21
1.2. Протеасомы в развитии животных 34
1.3. Система полиубиквитинирования белков 35
1.4. Сигналы убиквитинзависимой деградации белков 38
1.5. Изменения убиквитинзависимого протеолиза, связанные со злокачественной трансформацией 40
ГЛАВА 2. Материалы и методы
2.1. Животные и реактивы, используемые в работе 42
2.2. Препаративное выделение протеасом 43
2.2.1. Получение осветленного гомогенета и фракционирование протеасом сульфатом аммония 44
2.2.2. Гель-фильтрация на сефарозе 2В и
ультрацентрифугирование 45
2.3. Аналитическое выделение протеасом 46
2.4. Определение активности протеасом 47
2.5. Иммуноблоттинг 48
2.6. Получение 35[8]ОДК 48
2.7. Гистологическое исследование селезенки 50
ГЛАВА 3. Результаты
3.1. Разработка метода разделения пулов 26S- и 208-протеасом 52
3.2. Особенности формирования пулов 26S- и 208-протеасом в селезенке и печени крысы в постнатальном развитии 58
3.2.1. Изменение удельной активности и субъединичного состава пулов 26S- и 208-протеасом в селезенке и печени на 1, 5, 9, 12, 15, 23, 37 и 90 сутки развития крысы 59
3.2.2. Динамика появления иммунных субъединиц в пулах 26S- и 20S- протеасом в селезенке и печени крысы в постнатальном развитии 64
3.2.3. Динамика изменения удельной активности пулов 26S- и 208-протеасом в постнатальном развитии 65
3.2.4. Оценка количества протеасом в пулах 26S и 20S в селезенке и печени крысы в постнатальном развитии 68
3.3. Развитие белой пульпы селезенки в онтогенезе крысы 72
3.4. Особенности пула протеасом в клетках асцитной карциномы Krebs-II мыши 75
3.4.1. Пул 268-протеасом в селезенке, печени, легких и асцитной карциноме Krebs-II мыши 75
3.4.2. Пул 208-протеасом в селезенке, печени, легких и асцитной карциноме Krebs-II мыши 80
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов
4.1. Особенности формирования пула 26S- и пула 208-протеасом в печени и селезенке крысы в постнатальном развитии 84
4.2. Формирование иммунных протеасом и вторичных лимфоидных органов (селезенки) крысы в постнатальном развитии 87
4.3. Особенности пула протеасом в злокачественно трансформированных клетках 88
4.3.1. Иммунные протеасомы злокачественных клеток 88
4.3.2. Конститутивные 268-протеасомы злокачественных клеток 91
4.3.3. 208-протеасомы злокачественных клеток 92
Заключение 93
Выводы 95
Список литературы
