Введение
1. Обзор литературы 10
1.1. Трансгенные животные 10
1.2. Методы получения трансгенных животных 10
1.2.1. Микроинъекция 11
1.2.2. Ретровирусные векторы 12
1.2.3. Эмбриональные стволовые клетки 13
1.2.4. Спермин и липосомы 14
1.2.5. Перенос ядер 15
1.2.6. Перенос генов с помощью искусственных хромосом (YAC,BAC) 16
1.3. Применение трансгенных животных 17
1.3.1. Трансгенные животные с новыми хозяйственно-полезными свойствами 17
1.3.2. Создание трансгенных животных устойчивых к
различным заболеваниям 19
1.3.3. Создание животных биореакторов для синтеза рекомби-нантных белков фармакологического и технологического назначения 20
1.3.4. Ксенотрансплантация 22
1.3.4.1. Проблемы при ксенотрансплантации 24
1.3.4.2. Экспериментальные наработки в ксенотрансплантации 29
1.3.4.3. Создание генетически модифицированных доноров 30
1.3.4.4. Исследования в области ксенотрансплантации 41
1.3.4.4.1. Экспрессия в культуре клеток 41
1.3.4.4.2. Создание трансгенных мышей 41
1.3.4.4.3. Создание трансгенных свиней 43
1.4. Негативное действие трансгенов 45
2. Материалы и методика исследований 49
2.1. Реактивы и оборудование 49
2.2. Схема исследований 50
2.3. Молекулярно-генетический анализ 52
2.4. Цитогенетические исследования 53
2.5. Гистологические исследования 55
2.6. Культивирование клеток трансгенных кроликов 57
3. Результаты и обсуждение 58
3.1. Ведение трансгенной линии и изучение наследования трансгена 58
3.2. Влияние наличия трансгена на некоторые физиологические показатели животного 62
3.3. Цитогенетические исследования 65
3.3.1. Описание нормального кариотипа кролика 65
3.3.2. Изучение влияния экзогена на стабильность кариотипа трансгенных кроликов 68
3.4. Гистологические исследования печени, почек, селезенки
и сердца 75
3.5. Исследование влияния экспрессии трансгена на реакцию
отторжения на модели in vitro 82
4. Выводы 90
5. Практические предложения 92
6. Список литературы 93
7. Список сокращений 124
