Введение
1. Обзор литературы 10
1.1. Передача гормонального сигнала в растениях 10
1.2. Передача цитокининового сигнала в растении 15
1.2.1. Физиологические функции цитокининов 15
1.2.2. Биосинтез цитокининов 17
1.2.3. Механизм трансдукции цитокининового сигнала 19
1.2.3.1. Мембранные рецепторы цитокининов - гибридные гистидиновые протеинкиназы 19
1.2.3.2. Трансдукция сигнала внутри клетки: фосфотрансмиттеры 22
1.2.3.3. Гены первичного ответа на цитокинин и их продукты -регуляторы ответа 23
1.2.3.4. Передача цитокининового сигнала через мембранный рецептор, общая схема 27
1.2.3.5. Цитотазматические рецепторы цитокинина 29
2. Экспериментальная часть 39
2.1 Материалы и методы исследования 39
2.1.1. Объекты исследования 39
2.1.2. Выделение растворимых растительных белков для
подбора условий иммуноцитохимического анализа ЦСБ-70 40
2.1.3. Выделение ЦСБ-70 для анализа специфичности моноклональных антител разных групп 40
2.1.4. Измерение концентрации белка 41
2.1.5. Проведение аналитического электрофореза и иммуноблоттинга ЦСБ-70 42
2.1.6. Иммуноферментный анализ влияния фиксации и дегидратации на сохранение иммунореактивности ЦСБ-70 42
2.1.7. Иммуноферментный анализ влияния химических реагентов на сохранение иммунореактивности ЦСБ-70 44
2.1.8. Фиксация и заливка в смолу растительной ткани 45
2.1.9. Выявление ЦСБ-70 на полутонких срезах для световой микроскопии с помощью иммуномечения 47
2.1.10. Выявление ЦСБ-70 на ультратонких срезах для электронной микроскопии с помощью иммуномечения 48
2.1.11. Количественная оценка выявления ЦСБ-70 с помощью электронной микроскопии в компартментах клеток проростка кукурузы 49
2.2. Результаты и обсуждение 51
2.2.1. Разработка методов иммуноцитохимического исследования локализации ЦСБ-70 в тканях и клетках проростка кукурузы 51
2.2.1.1. Исследование воздействия на ЦСБ-70 реагентов, используемых для обработки растительного материала 51
2.2.1.2. Подбор условий для иммобилизации растительного материала в полимерную среду 56
2.2.1.3. Подбор условий для иммуноцитохимического выявления ЦСБ-70 на срезах растительной ткани 58
2.2.2. Подбор антител для дифференцированного выявления ЦСБ-70 в органеллах растительных клеток 61
2.2.3. Иммуноцитохимическое исследование локализации ЦСБ-70 в цитоплазме и ядрах клеток проростка кукурузы 63
2.2.4. Иммуноцитохимическое исследование локализации ЦСБ-70 в пластидах клеток проростка кукурузы 74
Заключение 86
Выводы 90
Список цитированной литературы 91
